Bac-to-Bac/BmNPV杆状病毒在家蚕幼虫中表达重组鲎C因子
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苏州市科技局项目 (No. ZXY2012011) 资助。


Expression of limulus Factor C in silkworm larvae by Bac-to-Bac/BmNPV baculovirus expression system
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Suzhou Science and Technology Committee (No. ZXY2012011).

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    摘要:

    鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素具有高亲和力的丝氨酸蛋白酶,被内毒素激活后可水解人工合成的三肽底物,因而能替代传统的鲎试剂用于内毒素检测。通过RT-PCR从东方鲎血细胞中扩增出鲎C因子基因 (factor C) 序列,利用Bac-to-Bac/BmNPV杆状病毒表达系统在家蚕幼虫中表达该蛋白,并对其进行活性测定。结果显示:被感染的家蚕血清稀释后能检测到Factor C活性,稀释500倍的血清可以用于内毒素检测,且其灵敏度能达到0.2 EU/mL,有望开发新型的、低成本的内毒素检测试剂。

    Abstract:

    Limulus Factor C, a serine protease zymogen from the amoebocytes of the limulus, has high affinity for endotoxin. When Factor C is activated by endotoxin, it hydrolyses artificial tripeptide substrate and measurable products are released, so it can be used as an alternative reagent for endotoxin analysis. Factor C gene of Tachypleus tridentatus was obtained through RT-PCR and the recombinant protein was expressed by Bac-to-Bac/BmNPV baculovirus expression system in silkworm larvae. The activity of Factor C was detected with diluted serum of silkworm larvae , and the sensitivity of endotoxin detected was 0.2 EU/mL when the serum was diluted at 1:500. The silkworm larvae expressed limulus Factor C could be used to develop a new low-cost endotoxin test reagent.

    参考文献
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引用本文

祁静,刘涛,李珍,贡成良,吴海苹,张春. Bac-to-Bac/BmNPV杆状病毒在家蚕幼虫中表达重组鲎C因子[J]. 生物工程学报, 2014, 30(10): 1594-1601

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  • 收稿日期:2013-12-25
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  • 在线发布日期: 2014-09-30
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