角质细胞生长因子2基因 (KGF2) 的克隆及其对油菜的遗传转化
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国家高技术研究发展计划 (863计划) 生物反应器重大专项 (No. 2007AA100503),吉林省和长春市科技发展计划项目 (Nos. 20070922, 06GG150),高等学校科技创新工程重大项目培育资金 (No. 70S018) 资助。


Cloning of Keratinocyte growth factor 2 gene (KGF2) and its transformation to Brassica napus L.
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Fund Project:

Special Program of National High Technology Research and Development Program of China (863 Program) for Research of Bioreactor in China (No. 2007AA100503), Science and Technology Development Projects of Jilin Province and Changchun City (Nos. 20070922, 06

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    摘要:

    近年来,植物表达人源蛋白的研究逐渐增多。本研究以人角质细胞生长因子 (KGF2) 基因cDNA为基础,根据植物偏好密码子进行改造,并利用PCR方法合成KGF2基因全长cDNA。在此基础上构建了KGF2的植物油体系统表达载体p1390-YO-KGF2,并采用农杆菌介导法对甘蓝型油菜无菌苗的子叶进行转化。通过PCR、Southern杂交和Western blotting检测,证明外源基因KGF2已经转入油菜中并得到成功表达。

    Abstract:

    Recently, more research about the plant bioreactor expressing genes encoding human proteins was reported. In the present study, the cDNA of the human gene keratinocyte growth factor 2 (KGF2) was replaced with plant preferred codons by PCR, and the modified full-length cDNA was cloned into the plant expression vector pCAMBIA-YO containing the oil-body promoter. The fusion construct pCAMBIA-YO-KGF2 was transformed into Brassica napus by Agrobacterium tumefacien-mediated cotyledon transformation method. The transgenic seedlings were identified by PCR, Southern and western blot analysis all showed that KGF2 gene was successfully expressed in in transgenicBrassica napus.

    参考文献
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引用本文

潘国庆,张爽,刘秀明,李营,张耀方,李洪志,李海燕,李校堃. 角质细胞生长因子2基因 (KGF2) 的克隆及其对油菜的遗传转化[J]. 生物工程学报, 2010, 26(6): 767-771

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  • 收稿日期:2009-12-13
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