猪γ干扰素的表达及其抗病毒活性的安全检测
Expression of porcine interferon-γ and its safe antiviral assay
投稿时间:2009-11-20  
DOI:  
中文关键词:猪γ干扰素,杆状病毒,抗病毒活性检测
英文关键词:porcine interferon-γ, baculovirus, antiviral activity
基金项目:国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2005CB523202) 资助。
作者单位E-mail
贺番 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特 010018  
孙元 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001  
葛金英 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001  
李淼 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001  
常天明 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001  
步志高 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001  
仇华吉 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨 150001 huajiqiu@hvri.ac.cn 
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中文摘要:
      为了提高干扰素抗病毒活性测定的生物安全性,本研究使用含有GFP的复制缺陷型水疱性口炎病毒 (VSV△G*G) 为指示病毒,分别对经原核表达系统和杆状病毒表达系统表达的重组猪γ干扰素 (PoIFN-γ) 在MDBK细胞上进行抗病毒活性测定。结果显示:由杆状病毒表达的重组PoIFN-γ具有高度抗病毒活性,其抗病毒活性为105 IU/mL,原核表达的重组PoIFN-γ纯化后经缓慢复性也会产生一定的抗病毒活性,其抗病毒活性为32 IU/mL。该方法与利用表达GFP的重组水疱性口炎病毒 (VSV*GFP) 所检测的干扰素抗病毒活性结果完全一致,表明复制缺陷型病毒VSV△G*G可作为复制型重组病毒的替代品,使得干扰素抗病毒活性检测更加安全、准确。
英文摘要:
      In order to ensure the biosafty of the IFN-γ antiviral activity assay, we used a replication-deficient VSV carrying GFP as an interferon sensitive indicator virus (VSV△G*G). The antiviral activities of porcine IFN-γ expressed in Escherichia coli and in baculovirus on MDBK cells were assessed. The results showed that the antiviral activity of porcine IFN-γ expressed in baculovirus could reach 105 IU/mL, while the porcine IFN-γ expressed in E. coli showed some antiviral activity (32 IU/mL) after refolding. The results of the VSV△G*G-based antiviral assay were almost identical to that of the VSV*GFP-based assay, suggesting it is highly feasible to use VSV△G*G as a substitute for VSV*GFP, making assays for IFN-γ antiviral activity safer and more accurate.
贺番,孙元,葛金英,李淼,常天明,步志高,仇华吉.猪γ干扰素的表达及其抗病毒活性的安全检测[J].生物工程学报,2010,26(4):439~447
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