融合蛋白CTP-SOD在毕赤酵母中的表达、纯化及抗氧化能力
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重庆市自然科学基金项目 (No. CSTC2009BB1131) 资助。


Expression and purification of fusion protein CTP-SOD in Pichia pastoris and antioxidant capacity analysis
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Natural Science Foundation of Chongqing (No. CSTC2009BB1131).

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    摘要:

    超氧化物歧化酶(SOD)是一种在生物界广泛存在的抗氧化酶,在抗衰老、抗肿瘤、抗免疫疾病和电磁辐射上都起着重要的作用。本实验利用含有细胞质转导肽 (CTP,一种能够携带外源大分子穿过细胞膜,定位于细胞质的短肽) 基因序列的特异引物,以人总RNA反转录产物为模板,扩增出了CTP和人铜锌超氧化物歧化酶 (Cu/Zn SOD) 的融合基因。运用毕赤酵母表达系统成功表达了具有活性的CTP-SOD融合蛋白。CTP-SOD预处理HeLa细胞后,明显提高了邻苯三酚 (Progallol) 诱导氧化胁迫下HeLa细胞的存活率,和对照组野生型SOD相比具有显著性差异。结果表明,CTP-SOD融合蛋白比野生型SOD更容易进入细胞,具有更高效的抗氧化功能。

    Abstract:

    Cytoplasmic transduction peptide (CTP) is a newly designed transduction peptide, by which special molecules can be carried out and localized into cytoplasmic compartment. Superoxide dismutase (SOD) is a protein that is difficult to go into cytoplasm. In this study, CTP-SOD fusion gene was amplified from human cDNA by PCR, and the active recombinant protein was successfully expressed in Pichia pastoris. HeLa cells pretreated with CTP-SOD showed a significantly improved survival against the pyrogallol-induced oxidative stress, suggesting CTP-SOD could cross the cell membrane more efficiently and protect cells from oxidative stress.

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    引证文献
引用本文

李沛志,任军乐,安婷,刘堰. 融合蛋白CTP-SOD在毕赤酵母中的表达、纯化及抗氧化能力[J]. 生物工程学报, 2010, 26(3): 324-329

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  • 收稿日期:2009-10-29
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