霍乱弧菌569B染色体DNA，经毒源性大肠杆菌不耐热毒素基因探针定位，确定霍乱毒素基因分别位于EcoRI/pst I 酶解的5.1和5.4kb片段。我们分离其EcoR I/Pst I 酶解的4.5—6．0kb片段，与经EcoR I／Pst I 酶解的质粒pBR322体外连接转化大肠杆菌，经原位菌落杂交及重组质粒DNA的电泳分析鉴定，获得了霍乱毒素基因的克隆。通过生物活性和抗原性测定，表明霍乱毒素基因在大肠杆菌中获得了表达。