抗松材线虫纤维素酶单链抗体库的构建及筛选
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    构建鼠源性松材线虫纤维素酶(Bursaphelenchus xylophilus cellulase, BXC)的噬菌体单链抗体库,从中筛选特异性BXC的单链抗体。以BXC为抗原免疫BALB/C小鼠,从脾脏提取总RNA,用RT-PCR技术扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因。经重叠PCR(SOE-PCR)在体外将VH和VL连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,成功构建了库容为5×104的Anti-BXC单链抗体库,并从该抗体库中初步筛选到了特异性识别BXC的噬菌体单链抗体scFv。将表面展示单链抗体的单克隆噬菌体转化大肠杆菌HB2151进行可溶性表达,SDS-PAGE及Western blot分析结果显示,可溶性scFv获得表达,且与BXC具有结合活性,为松材线虫的检验检疫以及病理学研究奠定了基础。

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田旺 张奇 杨文博 白钢. 抗松材线虫纤维素酶单链抗体库的构建及筛选[J]. 生物工程学报, 2005, 21(6):

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