抗CEA免疫毒素的表达、纯化、复性与生物学活性的研究
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    以抗癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen, CEA)单链抗体与假单胞菌外毒素(Pseudomonas exotoxin A, PEA)的截短和修饰形式PE38/KDEL构建重组免疫毒素CEA/PE38/KDEL,并在大肠杆菌菌株BL21(DE3)-star中表达。采用镍离子螯合层析法纯化变性的包涵体样品,并用连续梯度透析的方法对纯化后的包涵体进行复性。采用流式细胞术鉴定复性产物与靶细胞的结合活性,结果表明免疫毒素CEA/PE38/KDEL具有与靶细胞特异性结合的活性。以MTT法检测免疫毒素对肿瘤细胞的体外杀伤活性,结果表明该免疫毒素对SW1116和CNE_2细胞具有特异性杀伤活性。证明了经包涵体复性的抗CEA免疫毒素CEA/PE38/KDEL对表达CEA抗原的肿瘤细胞具有良好的结合和杀伤活性。

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引用本文

杨慧 何丹 晁开 林晴 游松 黄华樑. 抗CEA免疫毒素的表达、纯化、复性与生物学活性的研究[J]. 生物工程学报, 2004, 20(3):

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