嵌合表皮生长因子疫苗E5T-mSEA的设计及抑瘤活性检测
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国家自然科学基金项目 (No. 30300417) 资助。


Design and activity analysis of chimeric epidermal growth factor fusion vaccine E5T-mSEA
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National Natural Science Foundation of China (No. 30300417).

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    摘要:

    表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor , EGFR)及其配体在多种肿瘤细胞中高表达,免疫注射表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)-载体蛋白所产生的抗体能够干扰EGFR与EGF的相互作用,进而抑制肿瘤生长。本实验室设计了EGF和TGFα的嵌合配体E5T,并将具有免疫增强作用的葡萄球菌肠毒素A (Staphylococcal enterotoxin A,SEA) 与之融合。融合蛋白在大肠杆菌内表达后,通过金属螯合亲和层析,得到了纯度较高的E5T-mSEA融合蛋白。将E5T-mSEA免疫小鼠,能够产生高滴度的抗体,该抗体能够同时识别EGF和TGFα。将抗E5T-mSEA免疫血清与肿瘤细胞共培养,在1:10的稀释度下能显著抑制EGFR阳性肿瘤细胞的生长,而对EGFR阴性肿瘤细胞293T的生长没有明显影响。

    Abstract:

    Epidermal growth factor receptor (EGFR) and its ligands (EGF and TGFα) are over-expressed in a variety of tumors. Immunization EGF-carrier protein inhibits tumor growth through abrogating binding of EGF to EGFR. Here, a chimeric protein of EGF and TGFα (E5T) was genetically fused to Staphylococcal enterotoxin A (SEA), a bacterial superantigenic protein which promotes humoral B cell response through enhancement of Ag-specific CD4 T cells activity. The resulted fusion proteins were expressed in Escherichia coli and purified though metal chelating affinity chromatography. Immunization of E5T-mSEA fusion protein in mice induced production of high titers antibodies, which recognize both EGF and TGFα. Anti- E5T-mSEA serum at dilution of 1:10 significantly inhibited growth of A431 cell lines but had little effect on 293T cell lines.

    参考文献
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    引证文献
引用本文

尹晴晴,贾海威,张艳红,刘传暄,马清钧,张部昌,钟辉,胥全彬. 嵌合表皮生长因子疫苗E5T-mSEA的设计及抑瘤活性检测[J]. 生物工程学报, 2010, 26(3): 357-362

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  • 收稿日期:2009-10-12
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