抗H5N1病毒嵌合IgA抗体基因的构建及其在CHO细胞中的表达
DOI:
作者:
作者单位:

作者简介:

通讯作者:

中图分类号:

基金项目:

国家自然科学基金项目(No. 30872223), 国家科技支撑计划项目(No. 2006BAD06A15)资助。


Construction of anti-H5N1 virus chimeric IgA antibody gene and its expression in CHO cells
Author:
Affiliation:

Fund Project:

National Natural Science Foundation of China (No. 30872223), National Key Technology Research and Development Program (No. 2006BAD06A15).

  • 摘要
  • |
  • 图/表
  • |
  • 访问统计
  • |
  • 参考文献
  • |
  • 相似文献
  • |
  • 引证文献
  • |
  • 资源附件
  • |
  • 文章评论
    摘要:

    为了表达具有中和活性的抗禽流感H5N1病毒人-鼠嵌合IgA抗体, 采用RT-PCR法克隆具有中和活性的抗禽流感H5N1-HA鼠源单克隆抗体的轻重链可变区基因及相应的信号肽编码序列, 分别与人免疫球蛋白IgA2重链恒定区、Kappa恒定区基因拼接, 构建表达质粒pEF-IGHA9和pEF-IGK9, 共转染二氢叶酸还原酶缺陷型CHO(CHO-dhfr-)细胞,用ELISA检测培养上清中嵌合IgA抗体的表达, 对纯化的嵌合抗体进行SDS-PAGE、Western blotting 印迹分析。结果成功地在CHO细胞中表达了抗禽流感H5N1病毒人-鼠嵌合IgA抗体, 为制备抗H5N1重组分泌型IgA预防性抗体制剂奠定了良好的基础。

    Abstract:

    To express human-mouse chimeric IgA antibody directed against H5N1 virus, an anti-H5N1 chimeric IgA antibody gene was constructed by joining the light and heavy chain variable region genes and the corresponding signal peptide coding sequences of the anti-H5N1 mouse monoclonal antibody H5N1-HA with the coding sequences of the constant region of the human IgA2 heavy chain and Kappa chain respectively. Then the full-length chimeric light and heavy chain expressing plasmids pEF-IGHA9 and pEF-IGK9 were constructed and transfected into the CHO/dhfr- cells. The chimeric IgA antibody expression was confirmed by ELISA, SDS-PAGE and Western blotting. The successful expression of this anti-H5N1 chimeric IgA may help to provide a stand for developing passive immunological agents for H5N1 virus infection prophylaxis.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

张宝中,张昕,陈万荣,刘大斌,王盛,安小平,冉多良,赵光宇,周育森,童贻刚. 抗H5N1病毒嵌合IgA抗体基因的构建及其在CHO细胞中的表达[J]. 生物工程学报, 2009, 25(5): 714-719

复制
分享
文章指标
  • 点击次数:
  • 下载次数:
  • HTML阅读次数:
  • 引用次数:
历史
  • 收稿日期:2008-12-10
  • 最后修改日期:
  • 录用日期:
  • 在线发布日期:
  • 出版日期:
您是第位访问者
生物工程学报 ® 2024 版权所有

通信地址:中国科学院微生物研究所    邮编:100101

电话:010-64807509   E-mail:cjb@im.ac.cn

技术支持:北京勤云科技发展有限公司