人尿激酶原全长cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达
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    通过磷酸钙共沉淀技术,将含有尿激酶原cDNA的表达载体(pSV2-PrUK)与含有二氢叶酸还原酶基因的表达质粒pSV2-dhfr-或MMTV—dhfr共转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株(CHO-dhfr-)。利用选择培养基选择出二氧叶酸还原酶基因表达阳性(dhfr+)的转化细胞灶。用溶解圈法测定尿激酶型纤溶酶原激活剂(u—PA)的生物活性,其中两株显著高于其他株细胞,命名为CLF-14和CLF-8,表达水平依次为24Iu/106细胞/48h,16Iu/106细胞/48h。用ELLSA测定CLF一14和cLF-8细胞上清,表现为强阳性,阳性值比阴性对照值(P/N)大于10,CLF-14和CLF-8细胞表达量分别为0.14-o.22μg/106细胞/48h和0.08-O.14μg/106细胞/48h。分泌产物能被抗尿激酶(UK)血清抑制,而不被抗组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的抗血清和正常兔血清抑制。

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引用本文

李风知 李秀珍 唐宏娣 张宏权 胡宝成 韩素文 俞炜源 方继明 黄翠芬. 人尿激酶原全长cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达[J]. 生物工程学报, 1991, 7(2):

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