在含0．3％甘氨酸的液体培养基中培养庆大霉素产生菌——棘孢小单孢菌，其菌丝形态有明显的改变，易被溶菌酶消化细胞壁而释放大量原生质体。菌丝的培养龄影响其相应原生质体的再生活性(即再生成菌落的能力)。以72h为最佳，48及120h菌龄的原生质体再生频率依次相当于72h的40％和10％左右。以PEG4000为融合剂。用直接法检出重组子，重组频率约为10～6，融合重组子中有一些菌株庆大霉素的摇瓶发酵效价在1900u／m1左右，比对照菌株有很大的提高。