表达IBDV VP2融合蛋白的重组MDV的构建及其免疫特性
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    将增强型绿色荧光蛋白基因(eGFP)与鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的VP2基因融合,插入马立克氏病毒(MDV)CVI988/Rispens的非必需区US10片段中,成功构建表达VP2融合蛋白的MDV CVI988转移载体pUC18-US10-VP2。将转移载体质粒与CVI988/Rispens疫苗毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),筛选获得表达VP2融合蛋白的重组MDV(rMDV)。聚合酶链式反应(PCR)和间接免疫荧光实验(IFA)证明,rMDV传至第31代仍能稳定表达VP2融合蛋白。用rMDV免疫SPF鸡,进行IBDV攻毒保护试验,1日龄SPF鸡分别用1000PFU、2000PFU、5000PFU的rMDV进行免疫,33日龄用100LD50的IBDV JS超强毒进行攻毒,鸡的免疫保护率分别为50%、60%、80%。值得注意的是,5000PFU的rMDV一次免疫1日龄SPF鸡,其法氏囊组织病理损伤等级与IBD中等毒力活疫苗常规二次免疫相当(2.0/1.5),其保护效果无显著差异(p>0.05),而与非重组病毒免疫组相比较,保护效果差异显著(P<0.01),这表明构建的表达IBDV VP2融合蛋白的rMDV可以有效地为SPF鸡提供免疫保护作用。

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引用本文

刘红梅 秦爱建 刘岳龙 金文杰 叶建强 陈鸿军 邵红霞 李迎晓. 表达IBDV VP2融合蛋白的重组MDV的构建及其免疫特性[J]. 生物工程学报, 2006, 22(3):

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