制备单修饰的PEG蛋白偶联物，对获得重复性好的修饰产品，减少后续分离步骤具有重要的意义。用N-羟基琥珀酰亚胺活化法对单甲氧基聚乙二醇 (mPEG，分子量20000) 进行活化，红外光谱分析, 并考察了其水解动力学性质。对重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)进行化学修饰，通过正交试验结合SDS-PAGE电泳检测建立了单条PEG链修饰rhG-CSF的条件，单修饰PEG-rhG-CSF的收率为90%。离子交换层析对修饰产物进行分离纯化，高效凝胶过滤色谱(SEC-HPLC)检测纯度达到97%。