| 绿色木霉纤维素酶CBHII基因的分子克隆 |
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| 中文关键词:木霉，纤维二糖水解酶，基因文库，分子杂交，克隆 |
| 英文关键词: |
| 基金项目: |
| 王建荣 张曼夫 |
| 上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海 200030；北京农业大学生物学院，北京 100094 |
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| 中文摘要: |
| 本文以噬菌体 lambda EMBL3 DNA为载体，通过克隆绿色木酶 (Trichoderma vi-ride)高分子量基因组DNA的部分酶解片段，并将重组分子进行体外包装后侵染 Escheri-chia. Coli K802，由此构建了绿色术霉基因文库。以李氏木霉(Trichoderma reesei)纤维素酶CBHII基因的末端片段为探针，用轮迥噬菌斑原位杂交从文库中筛选出CBHII基因的阳性克隆5个，随机取其中3个克隆用上述探针作斑点杂交，结果进一步证明克隆了全长或近全长的绿色木霉CBHII基因，用李氏术霉CBHI基因的末端片段探针作斑点杂交，结果提示CBHI与CBHII基因的末端序列之间无同源性存在。从斑点杂交的阳性克隆中提取DNA，酶切鉴定插入片段的长度，并克隆于质粒pUCI9，Southern 杂交结果证明获得了含绿色木霉CBHII基因的重组质粒pCBHII-14。 |
| 英文摘要: |
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| 王建荣,张曼夫. 绿色木霉纤维素酶CBHII基因的分子克隆[J]. 菌物学报, 1994, 13(3): |
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