| 球孢白僵菌丝氨酸蛋白酶基因CDEP-1在毕赤酵母中的表达 |
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| 中文关键词:毒力因子 凝胶过滤层析 抗血清 |
| 英文关键词: |
| 基金项目: |
| 范艳华1 $21 $2 冯静 方卫国 裴炎* |
| 农业部生物技术与作物品质改良重点实验室 重庆市农业生物技术重点实验室 西南大学生物技术中心 |
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| 中文摘要: |
| 我们从球孢白僵菌中克隆了丝氨酸蛋白酶Pr1类基因CDEP-1。为明确CDEP-1的功能、评价其在害虫生物防治中的潜力,需要大量制备具有生物活性的CDEP-1编码蛋白。由于大肠杆菌系统表达真核基因存在产物复性困难的问题,本文利用毕赤酵母系统来表达CDEP-1。结果表明,CDEP-1可在毕赤酵母中高效的分泌表达,而且产物活性高,甲醇诱导48h后上清液中的酶活即可达到38,266U/L。诱导表达的上清液经浓缩后进行凝胶过滤层析,得到了CDEP-1的初纯品,蛋白质含量为50mg/L。将纯化的蛋白酶CDEP-1免疫家兔,制备了CDEP-1的抗血清。Westernblotting分析表明,制备的抗血清可特异性地检测CDEP-1。 |
| 英文摘要: |
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| 范艳华,$2,$2,冯静,方卫国,裴炎. 球孢白僵菌丝氨酸蛋白酶基因CDEP-1在毕赤酵母中的表达[J]. 菌物学报, 2006, 25(1): |
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