| 黑曲霉pepD基因阻断突变菌株的构建及功能分析 |
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| 中文关键词:同源重组 外源蛋白 分泌表达 |
| 英文关键词: |
| 基金项目: |
| 赵春田1 2 彭远义2 唐国敏1 王敖全1* 王华明3 |
| 1.中国科学院微生物研究所 微生物资源前期开发国家重点实验室 2.西南农业大学 动物科技学院 3.Genencor International Inc |
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| 中文摘要: |
| 运用同源重组技术破坏了黑曲霉基因组中的pepD基因,该基因编码一种类subtilisin的胞外蛋白酶PEPD。实验以黑曲霉GICC2773基因组DNA为模板,PCR扩增pepD基因,并在此基因中间插入潮霉素抗性基因(hph)表达单元,由此产生了3.7kb的pepD阻断基因片段。将此阻断基因片段与载体pBS连接,构建成pepD基因阻断质粒pBSDH。采用原生质体-CaCl2/PEG法将酶切阻断质粒得到的含pepD基因和hph表达单元的3.7kb线性片段转化AspergillusnigerGICC2773菌株,在含潮霉素的平板上筛选潮霉素抗性转化子,从这些抗性转化子中经PCR检测分离到到1个pepD基因阻断突变菌株?pepD66。外源漆酶分泌活性分析显示,黑曲霉pepD基因的破坏使其外源漆酶的分泌表达有所提高。 |
| 英文摘要: |
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| 赵春田 彭远义 唐国敏 王敖全 王华明. 黑曲霉pepD基因阻断突变菌株的构建及功能分析[J]. 菌物学报, 2005, 24(3): |
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