| 黑曲霉N25植酸酶phyA基因在巴斯德毕赤酵母中高效表达的研究* |
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| 中文关键词:黑曲霉 植酸酶 phyA基因 毕赤酵母 高效表达 |
| 英文关键词: |
| 基金项目: |
| 王红宁1 2 马孟根1 吴琦1 刘世贵2 罗燕1 |
| 1 四川农业大学动物科技学院；2 四川大学生命科学学院 |
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| 中文摘要: |
| 从黑曲霉N25(A.niger China strain)中提取出染色体DNA,根据已经测定出的植酸酶phyA基因全序列设计了一对引物,采用高保真度的聚合酶Advangage-HF扩增到了去除信号肽和内含子后约1.4kb片段,对该片段进行了克隆及序列测定。将该序列与植酸酶phyA基因全序列进行了比较。以此片段构建成功了pPIC9K-phyA载体(命名为pPNP-1),并转化毕赤巴斯德酵母。经G418抗性筛选、酶活性测定、Southern印迹和Western印迹,获得了高效表达的转化子PP-NP-1(23869.4u/ml)、PP-NP-2(20533.0u/ml)、PP-NP-3(35646.7u/ml),其酶活性分别是出发菌株的酶活(513.4u/ml)的46.46倍、39.99倍和69.46倍,且转化子具有很好的遗传稳定性。 |
| 英文摘要: |
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| 王红宁 马孟根 吴琦 刘世贵 罗燕. 黑曲霉N25植酸酶phyA基因在巴斯德毕赤酵母中高效表达的研究*[J]. 菌物学报, 2001, 20(4): |
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