国家自然科学基金委员会(National Natural Science Foundation of China，NSFC) 2018年公布了与欧盟委员会(European Commission，EC) 共同资助中欧双方科学家在“环境生物修复新技术”领域的合作研究^[1]。项目“面向有机污染物消除的‘微生物、植物、电’多效耦合作用机制及低能耗型修复技术”属于该项合作内容。NSFC项目由中国科学院微生物研究所主持，参与单位有中国科学院生态环境研究中心、南京大学、中国科学技术大学和南京农业大学。项目设立3个研究课题(图 1)，分别是“有机污染物降解微生物组的功能解析和微生物菌群3D打印技术” “弱电能介入型生物强化处理系统中毒害性有机污染物的定向转化及调控机制” “植物-微生物耦合作用下人工湿地中新有机污染物的消除原理与技术”^[2]。EC项目包括7个研究模块(图 1)，由西北瑞士应用科学和艺术大学(University of Applied Sciences and Arts Northwestern Switzerland) 主持，参与单位包括莱比锡亥姆霍兹环境研究中心(The Helmholtz Centre for Environmental Research-UFZ)、德国杜伊斯堡-埃森大学(University of Duisburg- Essen)、比利时根特大学(Ghent University)、意大利博洛尼亚大学(University of Bologna)、西班牙赫罗纳大学(University of Girona)、希腊克里特大学(University of Crete) 等17个大学和研究机构，另外研发型企业参与项目研究，并承担研究成果转化。本文介绍包括NSFC和EC项目的主要研究内容和执行两年来取得的一些阶段性成果。

项目主要围绕新有机污染物(Emerging organic contaminants，EOCs) 的生物降解和新型环境生物技术开展研究，按照两家资助机构支持研究项目属性，中方更多开展应用基础研究，欧方则应用基础和技术研发兼顾。EOCs广泛存在于水体、土壤等环境中，威胁人类和环境健康。EOCs在环境中的转化、降解和最终归趋，以及针对EOCs的生物消除技术，是当前环境微生物学和环境生物技术发展的重点领域。中方研究团队以三氯卡班、利谷隆、磺胺甲噁唑和四溴双酚A等EOCs为代表(图 2)，从降解污染物的微生物组出发，在群体、菌株、降解酶/基因、降解途径及调控4个层面，研究菌群内部微生物之间及与环境电极和人工湿地植物之间的互作、EOCs降解机理，研发生物电化学与生物处理过程耦合、构建弱电介入型EOCs生物增效处理系统，研发植物-微生物联合修复EOCs污染的人工湿地技术，设计并立体构建适用于降解和消除EOCs的功能菌群，发展基于微生物3D打印技术等的新一代微生物修复技术。欧方团队除了针对上述EOCs类污染物之外，研究对象还包括水体中氮磷等污染物，并强调与企业合作进行成果转化，提升技术的成熟度。

图 1 中欧合作项目中课题设置和研究内容示意图 Fig. 1 Sub-projects (research packages) and major researches of the NSFC-EC joint project. (红色代表中方研究领域，3个课题由3个三角形代表；蓝色代表欧盟研究领域，由7个工作任务包组成) Red area shows the NSFC-funded researches, including three sub-projects. Blue area shows the EC-funded researches, including 7 working packages.

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项目执行2年来，研究团队在磺胺甲噁唑和四溴双酚A等污染物的生物降解菌株资源和降解过程方面取得了显著进展，获得了降解矿化磺胺甲噁唑和氯霉素的菌株和分解四溴双酚A的富集菌群，揭示了活性污泥细菌互营代谢矿化磺胺甲噁唑的生物学新机制，发现了活性污泥菌胶团形成细菌分解代谢氯霉素的新途径，克隆表征了氯霉素氧化脱毒关键酶新基因^[3-4]；揭示了氮掺杂石墨烯中N的掺杂态调控奥奈达希瓦氏菌Shewanella oneidensis MR-1胞外电子传递的机制^[5]；并利用废弃物动物羽毛和玉米秸秆制备了一系列N掺活性炭阳极材料^[6-7]。项目团队发现了电极中的吡咯型活性N原子对促进菌株MR-1的直接电子传递过程(DET) 和黄素类物质介导的间接电子传递过程(MET) 发挥了重要作用；分子动力学模拟结果证实，吡咯型活性N原子无论在DET还是MET过程中都拥有最小的动力学和热力学阻力，从而能够更有效地促进S. oneidensis的DET和MET过程^[3]。实验结果表明，家禽羽毛固废物衍生的N掺杂活性炭阳极材料，增加了电极表面电活性微生物的负载量，提高了S. oneidensis胞外电子传递效率，从而可以显著提高微生物电化学系统(BES) 产电性能^[4]。利用富N玉米芯为原材料通过高温热解的方法制备了三维N掺杂大孔碳泡沫(N-doped macroporous carbon foams，NMCFs)，并利用聚苯胺(PANI) 和聚吡咯(PPy) 作为外部N源，进一步对NMCFs中N物种的含量进行了调控。优化后的三维NMCF阳极使得混菌BES的最大功率密度达到了(4.99±0.02) W/m²，最大电流密度为(12.30±0.01) A/m²，是迄今为止性能最好的BES碳基阳极^[7]。

图 2 利谷隆、三氯卡班、磺胺甲噁唑和四溴双酚A的化学结构和微生物降解 Fig. 2 Chemical structures and microbial degradation of linuron, triclocarban, sulfamethoxazole, and tetrabromobisphenol A. (实线已经进行过相关酶学验证；虚线和问号表示本项目拟研究的内容) (solid lines represents known-process, broken line and question mark (?) represent processes to be investigated).

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项目研究团队还发现了弱电介入能够激活厌氧微生物还原脱氯效能及微生物互作，从而加速卤代芳烃污染物2, 4, 6-三氯酚还原脱氯及微生物协同降解^[8]；创制了可以灵活植入生物处理构筑物的污水增效处理加速器件及控制系统，电极模块主要包括电极部分、电力管理系统和承载部分(ZL201710332928.3)^[9]，提出了一种在不锈钢(SS)丝加工时在其表面沉积石墨的一步法改性工艺，拉伸石墨涂层不锈钢(dr-g/SS) 的电催化活性分别是SS和涂抹石墨涂层不锈钢(da-g/SS) 的20倍和7倍^[8]；以覆碳SS和碳毡为原料组装成夹层波纹型电极模块，电极最佳褶皱角度为40°，工作电极与对电极间距为2 mm；建立了模块化标件的设计工程标准和即插即用现场装配模式，发明了可控加速器件主导的强化型复合水解酸化技术及系列适配型工艺装置^[9]。

项目团队研究发现了土壤基质中四溴双酚A的不可提取态残留(TBBPA-NERs) 在好氧土壤中较为稳定，214 d内仅释放1.9%的母体及其代谢产物，添加TBBPA的降解菌苍白杆菌Ochrobatrum sp.菌株T会显著促进TBBPA-NERs的释放(10.9%) 和矿化(4.6%)，其中释放的组分主要是以酯键共价结合的NERs^[10]。研究团队回顾并总结了TBBPA在不同氧化还原条件下和湿地植物存在时的降解、矿化、代谢途径、NERs的形成与稳定性，以及这些过程的微观机理^[11]。此外，项目团队研究了不同氧化还原条件下腐殖酸对酚类污染物转化的影响。结果表明，氧化还原状态变化条件下腐殖酸能在很大程度上促进酚类污染物的非生物转化；更为重要的是，在腐殖酸分子发生还原-氧化过程中，酚类物质会与之相结合，进而实现自然环境中非常重要的化学型腐殖化过程。在水位频繁变化及富含腐殖质的湿地中，该机制可能是酚类污染物转化及腐殖化的重要途径^[12]。项目团队就人工湿地中新有机污染物的去除机制，包括基质吸附、微生物降解及植物吸收降解等展开了综述^[13]，针对生物电化学系统在污染物转化方面的应用，项目团队总结了生物电化学系统及其衍生技术在反硝化、脱氯以及去除多环芳烃、农药及抗生素等过程中的作用及其应用前景^[14]。

在3D打印方面，项目研究团队基于海藻酸钠、纤维素、Ⅰ-型卡拉胶、羧甲基纤维素钠、纳米导电材料等材料开发出可用于3D生物打印的“生物相容墨水”，表征了“生物相容墨水”的剪切稀释特性，结果表明，研发的“生物相容墨水”具有良好的印刷性能和导电性能，满足用于3D打印的材料所需的流变学特性和高效电子传递效率。实验结果表明，3D打印在生物膜里的特效杆菌Diaphorobacter sp.菌株LR2014-1和恶臭假单胞菌Pseudomonas putida菌株KT2440 (pDCA-1) 能够将利谷隆转化为3, 4-二氯苯胺并进一步完全降解；以电活性菌S. oneidensis MR-1为对象、基于3D生物打印平台构建了具有高菌浓度和优良胞外电子传递能力的3D人工电活性生物膜，实现了对甲基橙和硝基苯等毒害性有机污染物的强化去除。

尽管受到新冠疫情的影响，中欧国际合作项目在学术交流方面仍取得了系列重要进展。2019年1月23–25日在项目欧方负责人所在单位西北瑞士应用科学与艺术大学召开中欧项目启动大会，中国国家自然科学基金会和欧盟项目管理领导参加了启动会；2019年8月26日在中国科学技术大学召开中方项目进展研讨会；2019年11月25–29日，在南京、北京分别召开该合作项目中欧青年研究者学术进展研讨会；2020年3月9–10日中方项目组成员在线上参加欧方在比利时根特组织的中欧项目进展研讨会；2020年12月15–17日，在南京大学召开中方项目进展研讨会，欧方项目负责人和国家自然科学基金委项目主管和部门领导等线上参加并参与讨论。中欧双方共享了研究资源，并在研究方法和分析测试技术上统一标准。德国亚琛工业大学、瑞士西北应用科学与艺术大学等选派人员到中方团队开展研究工作，南京大学、南京农业大学等选派人员到欧方团队单位开展研究工作。

项目执行期共计4年。因新冠疫情，双方人员交流受到巨大影响，双方项目团队通过线上交流等形式努力开展合作，但合作效率和未来预期成果可能会受到影响。尽管如此，双方团队将通力协作，共克时艰，保障在科学上高水平完成项目任务。目前，中方团队已经进一步强化内部合作，并与欧方合作伙伴通力合作。在未来的两年时间里，项目团队将力争在EOCs降解机制、化学与生物处理过程耦合、弱电介入增效生物处理系统构建、植物-微生物联合修复人工湿地技术、微生物3D打印技术等方面取得科学突破，并推进项目成果转化。

致谢: 本文得到了项目研究任务负责人王爱杰、季荣、蒋建东、穆扬等教授和项目科研骨干梁斌、何玉洁等博士的支持，特此致谢！