丁酸梭菌替代金霉素对肉鸡腿肌肉品质和抗氧化功能的影响

http://dx.doi.org/10.13343/j.cnki.wsxb.20210461
中国科学院微生物研究所，中国微生物学会

文章信息

申文雪, 刘金松, 范小燕, 许英蕾, 吴艳萍, 张瑞强. 2022

SHEN Wenxue, LIU Jinsong, FAN Xiaoyan, XU Yinglei, WU Yanping, ZHANG Ruiqiang.

Effect of Clostridium butyricum as a replacement of chlortetracycline on quality and antioxidation of broiler leg muscle

微生物学报, 62(4): 1464-1472

Acta Microbiologica Sinica, 62(4): 1464-1472

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收稿日期：2021-08-04

修回日期：2021-08-20

网络出版日期：2021-10-28

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引用本文

申文雪, 刘金松, 范小燕, 许英蕾, 吴艳萍, 张瑞强. 丁酸梭菌替代金霉素对肉鸡腿肌肉品质和抗氧化功能的影响[J]. 微生物学报, 2022, 62(4): 1464-1472.

Shen Wenxue, Liu Jinsong, Fan Xiaoyan, Xu Yinglei, Wu Yanping, Zhang Ruiqiang. Effect of Clostridium butyricum as a replacement of chlortetracycline on quality and antioxidation of broiler leg muscle[J]. Acta Microbiologica Sinica, 2022, 62(4): 1464-1472.

丁酸梭菌替代金霉素对肉鸡腿肌肉品质和抗氧化功能的影响

申文雪¹ , 刘金松² , 范小燕² , 许英蕾¹ , 吴艳萍¹ , 张瑞强¹

1. 浙江农林大学动物科技学院, 动物医学院, 动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室, 浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室, 浙江杭州 311300;
2. 浙江惠嘉生物科技股份有限公司, 浙江安吉 313300

收稿日期：2021-08-04；修回日期：2021-08-20；网络出版日期：2021-10-28

基金项目：浙江省领军型创新团队项目(2020R01015)；浙江省重点研发项目(2019C02051，2020C02032)；浙江省绿色动物保健品重点农业研究院项目(2021Y30004)

摘要：[目的] 本文研究了丁酸梭菌替代金霉素添加到肉鸡日粮中，对肉鸡腿肌肉品质和抗氧化功能的影响。[方法] 随机选取1日龄健康艾拔益加(AA)肉仔鸡360只，分为3组，每组8个重复，阴性对照组(CON)饲喂基础日粮；抗生素组(ANT)饲喂添加75 mg/kg金霉素的基础日粮；丁酸梭菌组(CB)饲喂添加500 mg/kg丁酸梭菌(活菌数10⁹ CFU/g)的基础日粮，试验为期42 d。[结果] 与CON组相比，CB组肉鸡腿肌重、腿肌肉24 h红度(a*)、pH_{45 min}、pH_{24 h}、粗蛋白质和粗脂肪的含量显著提高，腿肌肉总抗氧化能力(total-antioxidant capacity，T-AOC)、过氧化氢酶(catalase，CAT)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GPx)活性升高，腿肌肉核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2)、GPx-1、SOD-1和SOD-2的基因表达水平上调(P < 0.05)；肉鸡腿肌肉24 h亮度(L*)、滴水损失、蒸煮损失和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量下降。ANT组腿肌重和腿肌肉pH_{45 min}及Nrf2、GPx-1和SOD-1的基因表达水平增高(P < 0.05)，腿肌肉滴水损失和MDA的含量下降。与ANT组相比，CB组腿肌肉粗脂肪含量和CAT活性显著升高(P < 0.05)，腿肌肉的滴水损失和24 h的L*降低。[结论] 日粮中添加丁酸梭菌可替代金霉素应用于肉鸡饲料中，激活Nrf2相关基因表达，改善肉鸡肌肉品质和抗氧化功能。

关键词：肉鸡丁酸梭菌腿肌肉品质抗氧化功能

Effect of Clostridium butyricum as a replacement of chlortetracycline on quality and antioxidation of broiler leg muscle

SHEN Wenxue¹ , LIU Jinsong² , FAN Xiaoyan² , XU Yinglei¹ , WU Yanping¹ , ZHANG Ruiqiang¹

1. College of Animal Science and Technology, College of Veterinary Medicine, Key Laboratory of Applied Technology on Green-Eco-Healthy Animal Husbandry of Zhejiang Province, Zhejiang Provincial Engineering Laboratory for Animal Health Inspection and Internet Technology, Zhejiang A & F University, Hangzhou 311300, Zhejiang, China;
2. Zhejiang Vegamax Biotechnology Co., Ltd., Anji 313300, Zhejiang, China

Received: 4 August 2021; Revised: 20 August 2021; Published online: 28 October 2021

_*Corresponding author: ZHANG Ruiqiang, E-mail: zrq1034@163.com.

Foundation item: Supported by the Leading Innovation Team Project of Zhejiang Province (2020R01015), by the Key Research and Development Program of Zhejiang Province (2019C02051, 2020C02032) and by the Project of Key Agricultural Institute of Green Animal Health Products of Zhejiang Province (2021Y30004)

Abstract: [Objective] This paper explored effect of C. butyricum as a replacement of chlortetracycline on quality and antioxidant function of broiler leg muscle. [Methods] A total of 360 healthy 1-day-old Arbor Acres broilers were randomly selected and classified into three groups, with 8 replicates each group. Negative control group (CON) was fed with basal diet, antibiotics group (ANT) basal diet supplemented with 75 mg/kg chlortetracycline, and C. butyricum group (CB) basal diet supplemented with 500 mg/kg C. butyricum (viable bacteria, 10⁹ CFU/g). The experiment lasted 42 days. [Results] Compared with CON group, CB significantly increased weight, 24h redness (a^*), pH_{45 min}, pH_{24 h}, crude protein content, and ether extract, decreased 24 h brightness (L^*), drip loss, cooking loss, and malondialdehyde (MDA) content, improved the total-antioxidant capacity (T-AOC), and the activity of catalase (CAT), total superoxide dismutase (T-SOD), and glutathione peroxidase (GPx), and up-regulated the expression of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2), GPx-1, SOD-1, and SOD-2 of broiler leg muscle (P < 0.05). ANT raised the weight and pH_{45 min}, reduced the drip loss and MDA content, and up-regulated the expression of Nrf2, GPx-1, and SOD-1 of broiler leg muscle compared with CON group (P < 0.05). CB group demonstrated lower drip loss and L^* after 24 h and higher ether extract and CAT activity of broiler leg muscle than the ANT group (P < 0.05). [Conclusion] C. butyricum can replace chlortetracycline for broiler feed, activate the expression of Nfr2 signaling pathway related genes, and which improves the quality and antioxidation of broiler leg muscle.

Keywords: broilers Clostridium butyricum leg muscle meat quality antioxidation

养殖规模化、高密度使得肉鸡疾病频发，抗生素作为家禽养殖业生长促进剂和药物添加剂，不仅能够提高家禽生长性能，还能预防疾病发生^[1]。但是，长期使用抗生素会引起动物机体菌群失调、免疫力下降、病菌产生抗药性、在环境和畜产品中出现残留、富集等现象^[2]，我国在2020年7月1日明确禁止在饲粮中添加抗生素作为促生长类药物。因此，抗生素替代品研究成为热点。益生菌因具有安全、无残留、可以改善动物生产性能、提高机体免疫力等特点，受到广泛关注^[3–4]。

丁酸梭菌，又名酪酸菌，广泛存在于土壤、动物和人的肠道中，为严格厌氧的革兰氏芽孢杆菌，能产生丁酸等有益物质^[5]，促进肠道对水和钠重吸收的能力^[6–7]，添加到饲料中可改善动物生产性能、提高饲料利用率和机体抗氧化能力^[8–9]。目前，关于丁酸梭菌在家禽生产中的应用，主要集中在调控家禽的生长性能和改善免疫功能等方面，而其对肉鸡腿肌肉品质和抗氧化功能影响的研究几乎没有报道。

肌肉pH、肉色和系水力等指标是肌肉感官和食用适口性的综合反映，不仅决定着消费者的消费取向，亦影响禽肉产品在后期加工和贮藏的质量^[10]。已有研究表明，肌肉品质与肌肉的抗氧化功能密切相关，肌肉pH迅速下降，会引起肌肉中可溶性蛋白质凝结，造成肌纤维细胞膜的通透性增加，使得肌肉表面液体渗出增加，而抗氧化物质可降低脂质过氧化对细胞膜的伤害，维持细胞膜完整性，降低肌肉表面光的反射，从而降低肌肉亮度值，提高肌肉红度值，进而改善肌肉品质^[11]。Nrf2是细胞氧化损伤调节的主要信号，其发挥抗氧化功能主要是通过调控下游相关酶和抗氧化基因的表达水平，从而有效地缓解机体的氧化应激程度，降低氧化应激诱发的损伤作用^[12]。因此，本研究通过在日粮中添加丁酸梭菌或金霉素，探讨二者对肉鸡腿肌肉品质、抗氧化功能和Nrf2相关基因的影响，为丁酸梭菌替代金霉素应用于家禽生产提供科学参考。

1 材料与方法 1.1 材料

1日龄AA肉仔鸡(常州玉成禽苗批发基地有限公司)；金霉素(粉剂，纯度为20%，浙江惠嘉生物科技股份有限公司)；丁酸梭菌(活菌数10⁹ CFU/g，浙江惠嘉生物科技股份有限公司)；色差仪(HunterLab公司)；pH计(Hanna Instruments公司)；电热鼓风干燥箱(上海锦屏仪器仪表有限公司)；自动定氮仪(上海纤检仪器有限公司)；陶瓷纤维马弗炉(广州越特科学仪器有限公司)；脂肪测定仪(海能仪器股份有限公司)；抗氧化酶试剂盒(南京建成生物工程研究所)；RNAiso试剂、PrimeScript^TM Realtime PCR kit试剂盒(TaKaRa公司)；微量分光光度计(杭州奥盛仪器有限公司)；梯度PCR仪(杭州博日科技有限公司)；Bio-Rad C1000 Touch^TM 96孔快速PCR仪(上海孚约商贸有限公司)。

1.2 方法

随机选取健康、体重均匀的1日龄AA肉仔鸡360只，分为3组，每组8个重复，每个重复15只，分别为阴性对照组(CON)、抗生素组(ANT)和丁酸梭菌组(CB)。CON组仅饲喂基础日粮，ANT组在基础日粮中额外添加75 mg/kg的金霉素(以纯品计)，CB组在基础日粮中额外添加500 mg/kg的丁酸梭菌(活菌数10⁹ CFU/g)^[13–15]。基础日粮的配制方法参考NRC (1994)^[16]，基础日粮配方和营养水平见表 1。

表 1. 基础日粮配方和营养水平 Table 1. Ingredients and nutrient levels of the basal diets

Items	0 to 21 days of age	21 to 42 days of age
Composition/%
Corn	52.5	54
Soybean (CP43 %)	25	17
Extruded-soybean	4.5	3.5
DDGS	8.5	7.5
Rice bran		6
Corn bran		2
Soybean meal	1.7	4.6
Limestone	1.4	1.4
Fermented soybean meal	2.4
Premix^①	4	4
Total	100.00	100.00
Nutrient levels^②
Crude protein/%	22.02	19.11
Metabolizable energy/(MJ/kg)	12.23	12.91
Ether extract/%	5.50	8.6
Lys/%	1.18	0.97
Met/%	0.54	0.45
Met+Cys/%	0.88	0.74
Thr/%	0.86	0.71
Trp/%	0.23	0.20
Ca/%	0.82	0.73
TP/%	0.65	0.57
①The premix provided the following per kg of diets: VA 10 000 IU, V_B1 2.2 mg, V_B2 8.0 mg, V_B5 40 mg, V_B6 4.0 mg, V_B12 0.013mg, V_D3 3 000 IU, V_E 30 IU, V_K3 1.3 mg, nicotinic acid 40 mg, biotin 0.04 mg, folic acid 40 mg, choline chloride 400 mg, D-pantothenate calcium 10 mg, Se 0.3 mg, Fe 80 mg, Mn 110 mg, Zn 65 mg, Cu 7.5 mg, I 1 mg. ②Metabolizable energy is calculated value, the others are measured values.

表选项

1.3 饲养管理

1日龄AA肉仔鸡饲养于同一栋鸡舍，每个重复饲养于同一个笼内，试验期间全程自由采食和饮水，24 h光照，每天清洗饮水器1次，消毒、免疫接种及疾病预防按常规方法进行。

1.4 样品采集

于试验期第42天，空腹12 h后，分别从各试验笼中选取一只生长状况中等的肉鸡，共计24只，进行屠宰取样，采集左侧腿肌样品称重后用于肉品质检测，采集右侧腿肌样品用于常规化学成分和抗氧化功能相关指标的检测。

1.5 腿肌肉品质和常规成分的测定

根据Jiao等^[17]描述的方法测定腿肌的滴水损失、蒸煮损失、屠宰45 min和24 h后的肉色(L*：亮度；a*：红度；b*：黄度)以及屠宰45 min和24 h后的pH。腿肌常规化学成分水分(moisture)、粗蛋白(crude protein，CP)、粗脂肪(ether extract，EE)和灰分(ash)含量的测定参照食品安全国家标准^[18–21]进行。

1.6 腿肌抗氧化酶的测定

取右腿肌肉组织样品按照试剂盒说明书，检测T-SOD (羟胺法)、MDA (硫代巴比妥酸法)、T-AOC (Fe²⁺还原法)、CAT(钼酸铵法)和GPx(酶促比色法)的水平。

1.7 腿肌抗氧化基因表达的测定

利用RNAiso试剂进行肌肉RNA的提取和洗涤，使用微量分光光度计测定RNA的纯度和浓度。反转录过程使用商业试剂盒PrimeScript^TM Realtime PCR kit进行，去除基因组DNA，反应体系为10 μL：2 μL 5×gDNA Eraser Buffer，1 μL gDNA Eraser，7 μL RNase Free dH₂O，反应条件为：42 ℃ 2 min，4 ℃冷却；反转录体系为20 μL：10 μL去除基因组DNA反应液，1 μL PrimeScript RT Enzyme Mix I，1 μL RT Primer Mix，4 μL 5×PrimeScript Buffer 2，4 μL RNase Free dH₂O，反应条件为：37 ℃孵育15 min，85 ℃孵育5 s，4 ℃冷却。从GenBank中获得目的基因序列，取保守区域使用软件Primer Premier 5设计引物，所需引物由杭州擎科梓煕生物技术有限公司合成，引物序列见表 2。使用TB Green Premix Ex Taq Ⅱ进行real- time PCR反应。反应体系采用20 μL体系进行：10 μL TB Green Mix Taq，0.8 μL上游引物，0.8 μL下游引物，2 μL cDNA模板，6.4 μL DEPC水。反应条件为：95 ℃预变性2 min；95 ℃变性5 s，60 ℃退火30 s，40个循环。基因的相对表达水平采用2^–ΔΔCT法计算。

表 2. 荧光定量PCR引物序列 Table 2. Sequence of primers real-time PCR

Target genes	Accession No.	Forward primers (5′→3′)	Reverse primers (5′→3′)
Nrf2	NM_205117.1	GATGTCACCCTGCCCTTAG	CTGCCACCATGTTATTCC
Keap1	KU_321503.1	GTACCAGATCGACAGCGTGG	GGCAGTGGGACAGGTTGAAG
HO-1	NM_205344	GGTCCCGAATGAATGCCCTTG	ACCGTTCTCCTGGCTCTTGG
CAT	NM_001031215.1	CGTTGGCGGTAGGAGTC	CCAGTGGTCAAGGCATCT
SOD-1	NM_205064.1	TTGTCTGATGGAGATCATGGCTTC	TGCTTGCCTTCAGGATTAAAGTGAG
SOD-2	NM_204211.1	CAGATAGCAGCCTGTGCAAATCA	GCATGTTCCCATACATCGATTCC
GPx-1	NM_001277853.1	CGCTACAGCCGCCACTT	TTCGGAGAATCCCACAACG

表选项

1.8 统计分析

试验数据利用统计产品与服务解决方案(statistical product and service solutions，SPSS) 21.0软件进行单因子方差分析(one-way ANOVA)，并采用邓肯氏(Duncan’s)法进行组间多重比较检验，P > 0.05表示差异不显著，P < 0.05表示差异显著，结果用平均值和标准误(the standard error of means，SEM)表示。

2 结果与分析 2.1 丁酸梭菌对肉鸡腿肌肌肉品质的影响

由表 3可知，CB组肉鸡腿肌重、屠宰后24 h的a*、pH_{45 min}和pH_{24 h}显著高于CON组(P < 0.05)，屠宰后24 h后的L*和蒸煮损失显著低于CON组(P < 0.05)，屠宰后24 h和48 h后的滴水损失显著低于CON组(P < 0.05)。ANT组肉鸡腿肌重和pH_{45 min}显著高于CON组(P < 0.05)，屠宰24 h和48 h后的滴水损失显著低于CON组(P < 0.05)。ANT组肉鸡腿肌屠宰24 h和48 h后的滴水损失显著高于CB组(P < 0.05)，24 h的L*显著高于CB组(P < 0.05)。

表 3. 丁酸梭菌对肉鸡腿肌肉品质的影响 Table 3. Effects of Clostridium butyricum on the meat quality of leg muscle in broilers

Items		CON	ANT	CB	SEM	P-value
Leg muscle weight/g		294.48^b	340.08^a	340.75^a	8.07	0.019
Meat color at 45 min	L*	35.32	32.19	32.30	1.20	0.502
	a*	22.39	23.73	22.72	0.39	0.365
	b*	11.85	13.20	13.61	2.69	0.412
Meat color at 24 h	L*	27.63^a	25.42^a	24.81^b	0.47	0.029
	a*	22.20^b	23.69^ab	25.72^a	0.60	0.049
	b*	26.47	26.50	27.68	0.52	0.576
pH	pH_{45 min}	5.88^b	6.10^a	6.10^a	0.35	0.013
pH	pH_{24 h}	5.70^b	5.79^ab	5.86^a	0.03	0.044
Drip loss/%	24 h	4.95^a	4.27^b	3.63^c	0.13	< 0.001
Drip loss/%	48 h	7.39^a	6.38^b	5.32^c	0.21	< 0.001
Cooking loss/%		28.47^a	23.99^ab	23.57^b	0.79	0.012
In the same row, values with the no letter or same superscripts mean no significant difference (P > 0.05), means with different is superscript letters in the same row differ significantly (P < 0.05). The same as below.

表选项

2.2 丁酸梭菌对肉鸡腿肌肉常规化学成分的影响

由表 4可知，CB组肉鸡腿肌肉粗蛋白质和粗脂肪含量显著高于CON组(P < 0.05)，水分、有机物和灰分含量与CON组相比无显著性差异(P > 0.05)。ANT组肉鸡腿肌肉与CON组水分、有机物、粗蛋白质、粗脂肪和灰分均未表现出显著性差异(P > 0.05)。CB组肉鸡腿肌肉粗脂肪含量显著高于ANT组(P < 0.05)。

表 4. 丁酸梭菌对肉鸡腿肌肉常规化学成分的影响 Table 4. Effects of Clostridium butyricum on conventional chemical compositions of leg muscle in broilers (%)

Items	CON	ANT	CB	SEM	P-value
Moisture	74.86	73.79	73.07	0.37	0.150
Organic matter	23.27	24.49	25.06	0.38	0.148
Crude protein	19.42^b	20.07^ab	21.63^a	0.35	0.034
Ether extract	3.82^b	4.08^b	5.15^a	0.21	0.028
Crude ash	1.87	1.72	1.86	0.07	0.617

表选项

2.3 丁酸梭菌对肉鸡腿肌抗氧化能力的影响

由表 5可知，CB组肉鸡腿肌T-AOC、T-SOD、CAT和GPx水平均显著高于CON组(P < 0.05)，MDA含量显著低于CON组(P < 0.05)。ANT组肉鸡腿肌MDA含量显著低于CON组(P < 0.05)，T-AOC、T-SOD、CAT和GPx水平与CON组无显著性差异(P > 0.05)。CB组肉鸡腿肌CAT含量显著高于ANT组(P < 0.05)。

表 5. 丁酸梭菌对肉鸡腿肌抗氧化酶活性的影响 Table 5. Effects of Clostridium butyricum on the antioxidant ability of leg muscle in broilers

Items	CON	ANT	CB	SEM	P-value
T-AOC/(U/mg protein)	0.33^b	0.47^ab	0.55^a	0.03	0.013
T-SOD/(U/mg protein)	45.63^b	57.05^ab	60.36^a	2.56	0.039
CAT/(U/mg protein)	0.71^b	0.95^b	1.44^a	0.08	< 0.001
GPx/(U/mg protein)	14.66^b	17.79^ab	20.62^a	0.80	0.005
MDA/(nmol/mg protein)	0.37^a	0.28^b	0.24^b	0.02	0.007

表选项

2.4 丁酸梭菌对肉鸡腿肌抗氧化相关基因表达的影响

由表 6可知，CB组肉鸡腿肌抗氧化基因Nrf2、GPx-1、SOD-1和SOD-2的表达水平显著高于CON组(P < 0.05)；ANT组肉鸡腿肌抗氧化基因Nrf2、GPx-1和SOD-1的表达水平显著高于对照组(P < 0.05)；CB组和ANT组肉鸡腿肌Nrf2、Keap1、GPx-1、SOD-1、SOD-2、CAT和HO-1的表达水平无显著性差异(P > 0.05)。

表 6. 丁酸梭菌对肉鸡腿肌抗氧化相关基因表达的影响 Table 6. Effects of Clostridium butyricum on antioxidation-related gene expression of leg muscle in broilers

Items	CON	ANT	CB	SEM	P-value
Nrf2	1.00^b	1.54^a	1.70^a	0.11	0.022
Keap1	1.00	0.77	0.74	0.07	0.222
GPx-1	1.00^b	1.60^a	1.69^a	0.11	0.019
SOD-1	1.00^b	1.45^a	1.50^a	0.08	0.013
SOD-2	1.00^b	1.32^ab	1.60^a	0.09	0.013
CAT	1.00	1.18	1.35	0.08	0.179
HO-1	1.00	1.31	1.34	0.10	0.299

表选项

3 讨论

在肉色指标测定中，L*值越高，肉色发白变软，肉品质越差，且L*值与pH值是负相关关系^[10]。滴水损失和蒸煮损失是衡量肌肉系水力强弱的2个重要指标，其值越低则说明系水力越高，而系水力越高，说明肌肉鲜嫩多汁^[22–23]。本研究的CB组，其pH值和屠宰24 h后的a*值显著提高，滴水损失和蒸煮损失以及屠宰24 h后的L*值显著降低，提示丁酸梭菌可改善肉鸡腿肌肉品质，且结果与前人研究的L*值与pH值呈负相关关系一致^[10]；屠宰后45 min和24 h肉鸡腿肌肉的pH值显著升高，推测丁酸梭菌可能通过减少肌肉的无氧呼吸，从而减少乳酸的生成，进而提高肉鸡腿肌肉的pH值；滴水损失和蒸煮损失的降低，提示丁酸梭菌能够提高肉鸡腿肌肉的保水性能。此外，本研究发现，抗生素仅改善了肉鸡的腿肌重、pH_{45 min}和滴水损失，且ANT组肉鸡腿肌屠宰24 h和48 h后的滴水损失显著高于CB组，提示丁酸梭菌在调控肉鸡腿肌肉发育和系水力方面优于金霉素。

研究表明，日粮中添加10⁹ CFU/kg丁酸梭菌可调控肉鸡肠道菌群的脂代谢，提高42日龄肉鸡腿肌肌内的脂肪沉积^[24]。本研究发现，丁酸梭菌不仅可提高肉鸡腿肌肉粗脂肪含量，还可提高肌肉粗蛋白质的含量，推测可能是添加的丁酸梭菌的剂量、日粮组成和饲养环境等不同所引起。刘亭婷等^[25]的研究表明，丁酸梭菌可促进肠道有益菌增殖，抑制有害菌的增殖，调控动物肠道菌群平衡，推测本研究丁酸梭菌改善肌肉营养物质沉积的原因可能是：丁酸梭菌进入肉鸡肠道后，调节了肠道微生物菌群平衡^[25]，增加了肠道绒毛高度与隐窝深度的比值，提高了肠道的消化吸收功能^[14]，从而改善了肌肉的脂代谢和蛋白质代谢过程，进而改善了肌肉营养物质沉积。此外，本试验中CB组的粗脂肪含量显著高于ANT组，说明丁酸梭菌在调控肉鸡腿肌肉脂代谢方面优于金霉素。

研究表明，日粮中添加丁酸梭菌可提高肉鸡肠道中GPx活性，降低肠道中MDA含量^[9]。本研究表明，日粮中添加丁酸梭菌可提高肉鸡腿肌T-AOC、T-SOD和GPx活性，降低MDA含量，提示丁酸梭菌可提高肉鸡腿肌的抗氧化能力。丁酸梭菌代谢可产生氢气、丁酸钠、丁酸等产物^[5]，Ohsawa等研究发现氢气不仅是重要的生理调节因子，还通过选择性地清除机体羟自由基，调控机体抗氧化功能^[26]，Zhang等研究表明，丁酸钠可降低肉鸡胸肌中MDA含量，增加CAT的活性^[27]，推测丁酸梭菌提高肉鸡腿肌抗氧化功能与丁酸梭菌的代谢产物有关。此外，本研究亦发现，与ANT组相比，CB组肉鸡腿肌的T-AOC和CAT水平提高，表明丁酸梭菌对改善肉鸡腿肌抗氧化性能的效果可能优于金霉素。

Nrf2的激活可上调SOD相关蛋白表达水平，抑制线粒体氧化应激反应，降低氧化应激损伤^[28–29]。SOD具有抗炎、抗病毒、抗辐射、抗衰老等作用，可将机体内氧化自由基还原，维持机体氧化与抗氧化的动态平衡^[30]。Endo等研究亦表明，MIYAIRI 588 (一种产丁酸的益生菌)可诱导大鼠Nrf2基因的表达，激活下游基因，增强机体的抗氧化功能^[31]。本试验结果表明，丁酸梭菌提高了肉鸡腿肌Nrf2、GPx-1、SOD-1和SOD-2基因的表达水平，这与本试验中抗氧化酶活性结果一致。本试验还发现，ANT组仅上调了Nrf2、GPx-1和SOD-1的基因表达水平，提示丁酸梭菌改善肉鸡腿肌的抗氧化能力优于金霉素。

4 结论

丁酸梭菌可替代金霉素应用于肉鸡饲料日粮中，其可改善肉鸡腿肌肉的品质，增强抗氧化能力，且作用效果优于金霉素。

References

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