一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用
  
DOI:  
中文关键词:表达载体,Ω序列,T7启动子,增强型绿色荧光蛋白
英文关键词:
基金项目:
罗文新  张军  杨海杰  李少伟  谢小燕  逄淑强  李少菁  夏宁邵
厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 厦门 361005
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中文摘要:
      构建的pTO-T7大肠杆菌高效融合表达载体,调控序列中有一个Ω序列和一个T7启动子串联;多克隆位点(MCS)包括8个常用酶切位点;可进行融合表达或者非融合表达,根据不同的需要加以选择;融合蛋白N端为T7g10的12个起始氨基酸,C端为His标签;含kan抗性基因作为选择标记。将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆至pTO-T7载体,在E.coli中的表达结果表明,融合EGFP达到菌体总蛋白量的50%以上,90%以上的融合蛋白以可溶性形式存在,融合后的EGFP仍保持原有的荧光性质。与同时构建的不含Ω序列的pT-T7载体的表达产量的比较研究结果表明,Ω序列在pTO-T7载体中能显著提高表达效率。
英文摘要:
      
罗文新,张军,杨海杰,李少伟,谢小燕,逄淑强,李少菁,夏宁邵.一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用[J].生物工程学报,2000,16(5):
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