生物柴油是用动植物油脂或长链脂肪酸与甲醇等低碳醇合成的脂肪酸甲酯，是一种替代能源。这里探讨了生物法制备生物柴油的过程，采用脂肪酶酯化和酯交换两条工艺路线进行催化合成。深入研究制备过程中，不同脂肪酶、酶的用量和纯度、有机溶剂、低碳醇的抑制作用、吸水剂的作用、反应时间和进程、底物的特异性和底物摩尔比等参数对酯化过程的影响。试验结果表明，采用最佳酯化反应参数和分批加入甲醇并用硅胶作脱水剂的工艺过程，酯化率可以达到92％，经分离纯化后的产品GC分析的纯度可达98％以上，固定化酶的使用半衰期可达到360h。同时对酯交换制备生物柴油过程中，甲醇的用量和甲醇的加入方式对脂肪酶催化过程的影响作了初步研究，优化后的酯交换率可达到83％。