耐辐射奇球菌类胡萝卜素C3',4'-脱氢酶底物特异性
Substrate specificity of carotenoid 3',4'-desaturase from Deinococcus radiodurans
投稿时间:2010-06-02  
DOI:  
中文关键词:耐辐射奇球菌,类胡萝卜素,C3',4'-脱氢酶, 底物特异性
英文关键词:Deinococcus radiodurans, carotenoid, C3',4'-desaturase, substrate specificity
基金项目:国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2007CB707804),国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2007AA021305),国家自然科学基金项目 (Nos. 30830006, 30670026, 30870035),农业部核技术农业应用项目 (No. 200803034) 资助。
作者单位E-mail
孙宗涛 浙江大学原子核农业科学研究所杭州 310029浙江省农业科学院病毒学与生物技术所杭州 310021  
田兵 浙江大学原子核农业科学研究所杭州 310029  
沈绍传 浙江大学原子核农业科学研究所杭州 310029  
华跃进 浙江大学原子核农业科学研究所杭州 310029 yjhua@zju.edu.cn 
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中文摘要:
      为了鉴定耐辐射奇球菌类胡萝卜素C3',4'-脱氢酶 (DR2250) 催化底物的特异性,利用PCR方法将dr2250基因的克隆到载体pUC19上,形成了重组载体pUC-CRTD。利用质粒共转化方法将不同组合的质粒pACCRT-EBIEu、pRK-CRTC和pUC-CRTD转化到大肠杆菌中,筛选阳性克隆并提取其色素进行产物分析。结果表明,DR2250修饰的底物具有选择性,它不能以未经过羟基化修饰的直链类胡萝卜素为底物,而能在C1(1') 羟基修饰的羟基化类胡萝卜素的基础上进行C3',4'-脱氢反应。
英文摘要:
      To examine the substrate specificity of carotenoid 3',4'-desaturase (DR2250) from Deinococcus radiodurans, we amplified the dr2250 gene by using PCR methods. The PCR products were digested by Hind III-BamH I and ligated into the vector pUC19, yielding recombinant vector pUC-CRTD. We analyzed the carotenoids of E. coli transformants containing pACCRT-EBIEu and (or) pRK-CRTC and (or) pUC-CRTD. Our results demonstrated that DR2250 had substrate specificity on the carotenoids with hydroxyl group at C1 (1').
孙宗涛,田兵,沈绍传,华跃进.耐辐射奇球菌类胡萝卜素C3',4'-脱氢酶底物特异性[J].生物工程学报,2010,26(10):1451~1455
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