亚心形四爿藻氢酶的稳定性及初步纯化
Stability of the hydrogenase from Tetraselmis subcordiformis and its preliminary purification
投稿时间:2010-05-20  
DOI:  
中文关键词:亚心形四爿藻,氢酶稳定性,硫酸铵分级沉淀
英文关键词:Tetraselmis subcordiformis, hydrogenase stability, ammonium sulfate precipitation
基金项目:国家重点基础研究发展规划 (973计划) (No. 2009CB220004),国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2006AA05Z106),国家自然科学基金 (No. 20806081),中科院知识创新工程重要方向项目 (Nos. KSCX2-YW-G-073, KSCX2-YW-373-2, KGCX2-YW-223, KSCX2-YW-G-002),辽宁省自然科学基金 (No. 20082152) 资助。
作者单位E-mail
彦飞 中国科学院大连化学物理研究所 海洋生物产品工程组大连 116023中国科学院研究生院北京 100039  
陈兆安 中国科学院大连化学物理研究所 海洋生物产品工程组大连 116023  
曹旭鹏 中国科学院大连化学物理研究所 海洋生物产品工程组大连 116023  
陆洪斌 中国科学院大连化学物理研究所 海洋生物产品工程组大连 116023  
薛松 中国科学院大连化学物理研究所 海洋生物产品工程组大连 116023  
张卫 中国科学院大连化学物理研究所 海洋生物产品工程组大连 116023 weizhang@dicp.ac.cn 
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中文摘要:
      亚心形四爿藻Tetraselmis subcordiformis是一种具有高产氢能力的海洋绿藻,在厌氧环境中经暗诱导调控,可进行一定时间的连续产氢。氢酶是亚心形四爿藻进行光合产氢的关键酶,本文研究了在厌氧环境中连二亚硫酸钠、β-巯基乙醇和丙三醇等试剂对氢酶的稳定性影响,考察了硫酸铵分级沉淀对氢酶的纯化效果及回收情况。结果表明,连二亚硫酸钠和丙三醇均能对氢酶起到较好的保护作用。60%~70%饱和度硫酸铵沉淀出的蛋白样品比酶活较高,且所含其他蛋白较少,可用于氢酶的进一步纯化。
英文摘要:
      Tetraselmis subcordiformis, a marine green alga, can produce hydrogen by photobiologically hydrolyzing seawater with hydrogenase. In this study, the preliminary purification of the enzyme was explored by ammonium sulfate precipitation, and the impact of sodium dithionite, b-mercaptoethanol and glycerol on the enzyme stability during the process was investigated. The experimental results illustrated that sodium dithionite provided significant protection on the hydrogenase by depleting oxygen, while glycerol, a protectant against the structure instability of the enzyme, also presented protection. Crude enzyme with specific activity of 0.557 U/mg protein was extracted using 60%?70% saturated ammonium sulfate solution supplemented with 200 mmol/L sodium dithionite and 5% glycerol, and the hydrogenase recovery yield was about 30%.
彦飞,陈兆安,曹旭鹏,陆洪斌,薛松,张卫.亚心形四爿藻氢酶的稳定性及初步纯化[J].生物工程学报,2010,26(7):1003~1008
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