猪肌肉素基因的cDNA克隆与表达
Cloning and Expression of the Pig Skeletal Muscle Musclin Gene
投稿时间:2007-11-29  
DOI:  
中文关键词:猪, 肌肉素基因, 表达, 纯化, 鉴定
英文关键词:pig, musclin gene, expression, purifacation, identification
基金项目:河南省重点科技攻关项目(No. 0523010500)资助。
作者单位E-mail
王伟杰 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
李宏基 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
韩立强 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
王月影 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
王静 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
李卫华 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
林茂旺 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
台玉磊 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
张志强 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
藏猛 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
王艳龄 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002  
杨国宇 河南农业大学动物生理生化实验室, 郑州 450002 haubiochem@163.com 
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中文摘要:
      从人肌肉素基因出发, 在dbEST数据库中进行同源性搜索, 找到七个有较高同源性的Expressed Sequence Tag(DY426490, CF787546, AJ660979, AJ664670, AJ663820, AJ680159, DN106254)。通过拼接和进一步RT-PCR实验验证, 获得猪肌肉素基因全长cDNA序列, 其全长651 bp, 开放阅读框为54~452 bp, 编码有132个氨基酸。同源性分析结果表明, 与人、小鼠和大鼠的肌肉素基因cDNA编码区(CDS)同源性分别为87.2%、77.6%和77.9%。利用克隆出的猪肌肉素cDNA, 构建表达载体pGEX-4T-1-musclin, 并在BL21大肠杆菌中成功表达和纯化了分子量为38.59 kD的融合蛋白GST-Musclin, 并运用蛋白印迹技术进行鉴定。
英文摘要:
      We found seven tag sequence with high homology in dbEST by using human musclin gene, and got its cDNA sequence, which consists of 651bp and the open reading frame was 54~452 bp detected by RT-PCR, encoding 132 amino acid residue protein . The new gene has high homology with that of human, mouse and rat, the rate is 87.2%, 77.6% and 77.9%, respectively; the gene fragment was cloned into expression vector pGEX-4T-1, and the recombinant was transformed into E. coli BL21. Induced by IPTG, the fusion protein GST-musclin, a 38.59 kD protein was successfully expressed in E. coli BL21 and identified by Western blotting.
王伟杰,李宏基,韩立强,王月影,王静,李卫华,林茂旺,台玉磊,张志强,藏猛,王艳龄,杨国宇.猪肌肉素基因的cDNA克隆与表达[J].生物工程学报,2008,24(7):1248~1252
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