耐辐射奇球菌类胡萝卜素C3',4'-脱氢酶底物特异性
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国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2007CB707804),国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2007AA021305),国家自然科学基金项目 (Nos. 30830006, 30670026, 30870035),农业部核技术农业应用项目 (No. 200803034) 资助。


Substrate specificity of carotenoid 3',4'-desaturase from Deinococcus radiodurans
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Fund Project:

National Basic Research Program of China (973 Program) (No. 2007CB707804), National High Technology Research and Development Program of China (863 Program) (No. 2007AA021305), National Natural Science Foundation of China (Nos. 30830006, 30670026, 30870035), Project ‘Application of Nuclear Techniques in Agriculture’ from the Chinese Ministry of Agriculture (No. 200803034).

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    摘要:

    为了鉴定耐辐射奇球菌类胡萝卜素C3',4'-脱氢酶 (DR2250) 催化底物的特异性,利用PCR方法将dr2250基因的克隆到载体pUC19上,形成了重组载体pUC-CRTD。利用质粒共转化方法将不同组合的质粒pACCRT-EBIEu、pRK-CRTC和pUC-CRTD转化到大肠杆菌中,筛选阳性克隆并提取其色素进行产物分析。结果表明,DR2250修饰的底物具有选择性,它不能以未经过羟基化修饰的直链类胡萝卜素为底物,而能在C1(1') 羟基修饰的羟基化类胡萝卜素的基础上进行C3',4'-脱氢反应。

    Abstract:

    To examine the substrate specificity of carotenoid 3',4'-desaturase (DR2250) from Deinococcus radiodurans, we amplified the dr2250 gene by using PCR methods. The PCR products were digested by Hind III-BamH I and ligated into the vector pUC19, yielding recombinant vector pUC-CRTD. We analyzed the carotenoids of E. coli transformants containing pACCRT-EBIEu and (or) pRK-CRTC and (or) pUC-CRTD. Our results demonstrated that DR2250 had substrate specificity on the carotenoids with hydroxyl group at C1 (1').

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引用本文

孙宗涛,田兵,沈绍传,华跃进. 耐辐射奇球菌类胡萝卜素C3',4'-脱氢酶底物特异性[J]. 生物工程学报, 2010, 26(10): 1451-1455

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  • 收稿日期:2010-06-02
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