• 2003年第19卷第2期文章目次
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    • 维管束特异表达启动子及其顺式调控元件

      2003, 19(2).

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      摘要:综述了维管束特异表达启动子及其顺式调控元件和基元序列调控基因表达的研究进展,它们在抗细菌、真菌性维管束病害的作物基因工程中具有广阔的应用前景。

    • 骨髓间充质干细胞的研究进展

      2003, 19(2).

      摘要 (1577) HTML (0) PDF 0.00 Byte (5615) 评论 (0) 收藏

      摘要:骨髓间充质干细胞是存在于骨髓中的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞群体,具有支持造血、多向分化潜能以及在细胞和基因工程中具有潜在应用前景等特点, 将在医学上具有重要的临床应用价值。

    • 禽细胞因子的新功能——免疫治疗和疫苗佐剂

      2003, 19(2).

      摘要 (1599) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2153) 评论 (0) 收藏

      摘要:许多国家已明令禁止在饲料中使用抗生素类饲料添加剂和化学抗菌药物,从而使得肉品生产者急于寻求新的替代产品。细胞因子是一种在感染或免疫接种后产生的蛋白质,能够影响免疫应答的类型和水平,因此是一种绝佳的天然替代产品。随着更多的禽细胞因子基因的发现,临床应用细胞因子成为可能。由于禽类的免疫系统与哺乳动物的相似,因此相关工作也为研究细胞因子在控制家畜疾病上提供了颇具前景的动物模型。这里综述了禽细胞因子的最新研究进展,并侧重阐明了细胞因子作为治疗制剂和疫苗佐剂的功能与前景。

    • 红树植物秋茄中液泡膜内在蛋白(TIP)全长cDNA的克隆和表达分析

      2003, 19(2).

      摘要 (1616) HTML (0) PDF 0.00 Byte (1790) 评论 (0) 收藏

      摘要:利用cDNA快速末端扩增(RACE )技术获得红树植物秋茄液泡膜内在蛋白(TIP)的全长cDNA (GenBank 登录号:AF521135)。该cDNA全长为11kb,含有一个756个核苷酸的完整开放阅读框,编码252个氨基酸,等电点为577,分子量为263 kD。该氨基酸序列含有6个跨膜区和两个高度保守的Asparagineprolinealanine (NPA)基序。与冬葡萄、花椰菜、拟南芥的TIP相比,氨基酸的一致性达到77%~79%。Northern分析表明盐分抑制该基因在红树3个种中的表达,这种下调表达可能降低液泡膜水分渗透,有利于盐胁迫下细胞的保水。

    • 分子标记辅助选择改良蜀恢527对白叶枯病的抗性

      2003, 19(2).

      摘要 (2522) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2479) 评论 (0) 收藏

      摘要:以含抗性基因Xa21和Xa4的抗白叶枯病近等基因系IRBB60为供体亲本,以不抗白叶枯病强恢复系蜀恢527为轮回受体亲本,连续回交3代,自交1代,在分离世代用分别与Xa21和Xa4紧密连锁的标记pTA248和MP12对目标基因Xa21和Xa4进行辅助选择,直至BC3F2。在BC3F2中选出株型、粒型、播抽期等农艺性状与蜀恢527相似且pTA248和MP12的扩增带型纯合的10个单株,用100个RAPD和120对SSR引物进行背景选择,决选出5个单株,作为改良的蜀恢527。抗性分析表明,这些改良的蜀恢527株系对我国菌系CⅠ-CⅦ和来自菲律宾的P1和P6均表现抗性,说明抗性基因已成功导入蜀恢527中并表达。同时对pTA248和MP12在亲本间的多态性和选择的准确性也进行了分析,结果显示这两个标记在亲本间的多态性明显,共显性;选择的准确率分别在97%和83%以上,可以用其进行标记辅助选择。

    • Flt3配体增强HCV核心包膜E2融合基因DNA疫苗诱导的细胞免疫应答

      2003, 19(2).

      摘要 (920) HTML (0) PDF 0.00 Byte (1521) 评论 (0) 收藏

      摘要:建立一种可高效诱导细胞免疫应答,对丙型肝炎病毒(HCV)感染可能起预防和治疗作用的DNA疫苗。将小鼠Flt3配体(FL)信号肽和胞外段cDNA插入结构优化的HCV核心包膜E2融合抗原DNA疫苗pST-CE2t,构建成pST-CE2t/FL。将pSTCE2t/FL转染COS7细胞,Western blot和ELISA检测表明该重组质粒能表达HCV核心包膜E2融合抗原和可溶性小鼠FL。分别将pST-CE2t、pST-CE2t/FL和空载体pCI-neo肌肉注射接种BALB/c小鼠,检测小鼠的体液和细胞免疫应答。结果表明两种DNA结构均能在小鼠体内诱生细胞和体液免疫应答,但pST-CE2t诱导的体液免疫应答强于pST-CE2t/FL,而后者诱导的细胞免疫应答明显强于前者。FL能明显增强HCV核心包膜E2融合抗原DNA疫苗诱导的细胞免疫应答,对于发展HCV预防和治疗性疫苗有潜在的应用价值。

    • 人类肿瘤坏死因子相关凋亡配体活性部位基因在毕赤酵母中的表达

      2003, 19(2).

      摘要 (1445) HTML (0) PDF 0.00 Byte (1885) 评论 (0) 收藏

      摘要:探讨了人类肿瘤坏死因子相关凋亡配体(TRAIL)生物活性部分在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达。由于TRAIL活性部位区第149150氨基酸含有一个Kex2位点,根据Pichia pastoris分泌表达的特点,对149位氨基酸进行了改造,使其编码的氨基酸由Arg突变为Lys。这样使TRAIL在分泌的过程中不被Kex2切割,保证了片段的完整。序列分析正确后,将编码TRAIL的可溶区的基因片段插入到酵母表达载体Ppic9k中,使之位于α因子信号肽下游,且与之同框,构建分泌型表达载体Ppic9kTRAIL。采用原生质体法将重组质粒转化Pichia pastoris菌株GS115,获基因工程菌株Pichia pastoris(Ppic9k-TRAIL)。将工程菌用甲醇诱导培养3~4d,对摇瓶发酵的培养上清进行SDS-PAGE、Western blot分析和体外生物活性检测,结果发现发酵液中分子量约为19kD和38kD的蛋白质能被TRAIL多克隆抗体特异性识别,且具有在体外诱导肿瘤细胞凋亡的活性。通过薄层扫描分析显示目的蛋白最高可占可溶性总蛋白的36%。上述实验结果表明,在Pichia pastoris中表达的TRAIL能以寡聚体的形式存在并且具有生物学活性。

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