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微生物学报

  • 2010年第50卷第7期文章目次
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    • >小型综述
    • 阪崎肠杆菌分类与致病机制

      2010, 50(7):841-846.

      摘要 (1696) HTML (0) PDF 554.07 K (1527) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:作为一种重要的食源性致病菌,阪崎肠杆菌因能引起新生婴幼儿脑膜炎、坏死性小肠结肠炎而受到了政府和社会的高度重视。2008年,阪崎肠杆菌被提议重新另立为隶属于肠杆菌科的一个包含有5个新种的新属——Cronobacter gen. Nov.。新属的五个种之间毒力作用存在差异,外膜蛋白A在黏附和抗吞噬过程中发挥了重要作用,同时本属菌株的侵入力在宿主细胞间的紧密联系被破坏时显著提高,但是一些肠道益生菌能抑制该菌侵入。目前阪崎肠杆菌的致病研究还比较分散,没有形成系统性,详细的致病机制期待进一步阐明。

    • 微生物燃料电池在环境污染治理研究中的应用进展

      2010, 50(7):847-852.

      摘要 (1887) HTML (0) PDF 596.00 K (1646) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:近年来,微生物燃料电池(Microbial fuel cells, MFCs)研究得到了迅速发展。由于可以将可生物降解有机物的化学能直接转化为电能,MFCs在环境污染治理及生物产电方面具有良好的应用前景。本文将全面介绍和总结MFCs在环境污染治理中的研究及应用,其中包括脱氮、脱硫、有机污染物降解、重金属污染治理以及垃圾渗滤液处理等方面。此外,本文还提出MFCs在研究及应用过程中存在的主要问题,并对其研究前景进行展望。

    • >分类和进化
    • 植物根际促生菌的筛选及鉴定

      2010, 50(7):853-861.

      摘要 (3184) HTML (0) PDF 1.15 M (2354) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】植物根际促生菌(PGPR)和植物的互作关系往往不稳定,PGPR菌群有可能提高菌株对野外环境的适应性。为此,本文根据PGPR促生机制的多样性,从不同植物根际土壤进行了PGPR的筛选及鉴定。【方法】首先,按照固氮、解磷、解钾、拮抗6种常见病原真菌,同时能在植物根际定殖为基本初筛标准,然后在实验室条件下测定初筛菌株的多项促生能力(PGP),最后通过生理生化试验和16S rRNA基因序列分析对所筛菌株进行鉴定。【结果】从江苏扬州、盐城等地土壤样品筛选出14株PGPR,具有体外抑菌、产NH3、产IAA

    • 智利海洋沉积物中放线菌多样性

      2010, 50(7):862-869.

      摘要 (1536) HTML (0) PDF 736.04 K (1343) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】认识智利海洋沉积物中放线菌的多样性。【方法】分别采用选择性分离培养和非培养的基于16S rRNA基因序列系统发育分析方法,对来自智利南部海域海洋沉积物中放线菌多样性进行研究。采用6种选择性分离培养基分离放线菌;利用放线菌特异性引物对样品总DNA进行16S rRNA基因序列扩增并构建了16S rRNA基因克隆文库。分别挑选不同培养特征的22株放线菌和59个基因克隆进行16S rRNA基因序列的系统进化分析;测定分离的放线菌对海水的依赖性及产生抗菌活性化合物的能力。【结果】共分离到328株放线菌

    • >生理和代谢
    • 三株高效秸秆纤维素降解真菌的筛选及其降解效果

      2010, 50(7):870-875.

      摘要 (2395) HTML (0) PDF 838.63 K (1952) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】利用多种筛选方法,获得高效秸秆纤维素降解真菌,并研究其秸秆纤维素的降解能力。【方法】采用滤纸片孔洞法、滤纸条降解法、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水解圈测定法、秸秆失重法、纤维素分解率测定法、胞外酶活测定法等常规秸秆纤维素降解菌的筛选方法。【结果】筛选到3株具有较强纤维素降解能力的真菌菌株,经初步鉴定菌株98MJ为草酸青霉(Penicillium oxalicum)、菌株W3为木霉(Trichoderma sp.)、菌株W4为扩张青霉(Penicillium expansum)。菌株W4具有

    • 损伤条件下油菜黄单胞菜豆致病变种内源过氧化氢与间体形成的联系

      2010, 50(7):876-884.

      摘要 (840) HTML (0) PDF 2.70 M (1029) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】本实验通过透射电子显微镜观察黄单胞菌在细胞损伤条件下的亚细胞结构和过氧化氢积累定位的变化。【方法】采用氯化铈对过氧化氢特异染色的组织化学法。【结果】细菌细胞受损伤后,出现了一个细胞壁之外的过氧化氢大量积累的额外位点。并且这个额外位点出现的频率和过氧化氢积累量都与细胞损伤的程度密切相关。另一方面,亚细胞结构的常规染色结果也显示,受到损伤的细胞中也出现一个额外的亚显微结构,即间体。间体出现的频率和大小也随着细胞损伤程度的增加而显著上升。【结论】多元线性回归分析的结果证明细胞损伤条件下细菌中出现的

    • >酶和蛋白质
    • 一株快速转化甜菊苷的细菌鉴定、产酶及转化特性

      2010, 50(7):885-890.

      摘要 (1398) HTML (0) PDF 1.03 M (1159) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】本研究旨在鉴定了一株筛选的甜菊苷特异降解菌、优化了该菌产β-葡萄糖苷酶的条件以及研究了该菌对甜菊苷的转化特性。【方法】经16S rRNA基因序列测序和系统发育学分析,结合形态学特征确定该菌株的系统发育地位。用单因素及多因素分析探讨了其对甜菊苷的降解,通过液质联用检测了降解产物。【结果】菌株-J2与巨大芽孢杆菌的16S rRNA基因序列相似性达到100%,结合形态学特征,鉴定该菌为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。在玉米淀粉4%、豆粕粉1%、硫酸镁0.04%、pH 7.0

    • 深海沉积物微生物元基因组文库来源的新的酯酶基因的克隆、表达及酶学性质

      2010, 50(7):891-896.

      摘要 (1358) HTML (0) PDF 2.18 M (1489) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】从深海沉积物微生物元基因组文库中克隆新的酯酶基因,并进行酶学性质研究。【方法】利用含有三丁酸甘油酯的酯酶选择性筛选培养基,从深海沉积物微生物元基因组文库中筛选得到酯酶阳性Fosmid克隆。对筛选得到的fosmid FL10进行部分酶切构建亚克隆文库,筛选得到酯酶阳性亚克隆pFLS10。PCR扩增目的片段后与pET28a连接构建酯酶基因原核表达质粒,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21。纯化表达产物并对其进行活性测定及酶学性质研究。【结果】序列分析显示该pFLS10亚克隆质

    • 绿僵菌异戊烯基转移酶基因的克隆及表达谱分析

      2010, 50(7):897-902.

      摘要 (1063) HTML (0) PDF 2.41 M (1042) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】 克隆绿僵菌异戊烯基转移酶(Mpt)基因,了解该基因的结构和表达特征。【方法】采用SMART(Switching Mechanism At 5' end of RNA Transcript)技术和PCR技术,扩增Mpt基因全长cDNA序列和DNA序列,用qRT-PCR方法分析该基因在绿僵菌不同侵染时期的表达谱。【结果】Mpt基因含2个外显子和1个内含子,CDS区为1026bp(GenBank登录号GU271134),编码341个氨基酸;qRT-PCR分析表明,该基因在绿僵菌侵染的不同时期表达

    • M41型A群链球菌的Ⅰ型胶原样蛋白与人低密度脂蛋白的相互作用

      2010, 50(7):903-908.

      摘要 (702) HTML (0) PDF 890.99 K (1036) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】检测M41型A群链球菌(GAS)ATCC12373中Ⅰ型胶原样蛋白(Scl1)与人低密度脂蛋白(LDL)的相互作用。【方法】克隆了M41型GAS ATCC12373的Ⅰ型胶原样蛋白(Scl1)及其V区(Scl1-V)基因,并表达、纯化重组蛋白rScl1 (C176)和rScl1-V (C176V)。通过重组蛋白与人血浆的亲和色谱层析、Western blot及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测C176、C176V与LDL的相互作用;通过GAS与LDL的ELISA试验和人血浆与GAS的共孵育试

    • >生态和环境微生物学
    • 松材线虫伴生细菌多样性的宏基组分析

      2010, 50(7):909-916.

      摘要 (1651) HTML (0) PDF 1.83 M (1886) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】松材线虫是松材线虫病的病原,且与其伴生细菌之间存在互作关系,它们构成一个微生态系统。本研究旨在揭示松材线虫-伴生细菌群落细菌多样性。【方法】采用16S rRNA基因文库和454测序对伴生细菌群落的宏基因组进行初步分析。【结果】依据97%序列相似性划分OTU(Operational Taxonomic Unit),构建的16S rRNA文库包含25个OTU,分别属于Alphaproteobacteria、Betaproteobacteria、Gammaproteobacteria和Bacter

    • 产紫青霉EL-02的分离鉴定及其絮凝活性

      2010, 50(7):917-922.

      摘要 (925) HTML (0) PDF 1.17 M (1813) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】分离鉴定有絮凝活性真菌,同时对其絮凝活性进行初步研究。【方法】采用梯度稀释、平板划线、18S rDNA检测等方法分离鉴定絮凝活性菌株。通过高速离心、超声破碎、乙醇沉淀、定性试验等方法确定絮凝活性物质性质。【结果】从渤海湾海岸土壤样品中分离筛选出一株有较高絮凝活性的真菌,经鉴定为产紫青霉(Penicillium purpurogenum),命名为产紫青霉EL-02(P. purpurogenum EL-02)。超声破碎试验证实其絮凝活性主要存在于发酵上清液。根据絮凝活性曲线,确定4 d为积累絮

    • 基于PCR-DGGE技术的红树林区微生物群落结构

      2010, 50(7):923-930.

      摘要 (1462) HTML (0) PDF 1.76 M (1854) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】为了解红树林沉积物中细菌的群落结构分布特征。【方法】应用PCR-DGGE技术对福建浮宫红树林的16个采样站位样品细菌的群落结构分布特征进行了研究。根据DGGE指纹图谱,对它们的遗传多样性进行了分析。【结果】各站位样品细菌多样性指数(H)、丰度(S)和均匀度(EH)均有所不同,这些差异与它们所处站位的不同有关,红树林区细菌多样性高于非红树林区细菌多样性。对不同站位细菌群落相似性分析,它们的相似性系数也存在一定的规律,同一断面的细菌群落结构相近性较高。对DGGE的优势条带序列分析,同源性最高的微

    • >侵染和免疫
    • 结核分枝杆菌Rv1168c蛋白的基因表达、纯化及结构分析

      2010, 50(7):931-936.

      摘要 (1456) HTML (0) PDF 1.07 M (1437) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】应用原核表达体系对结核分枝杆菌PPE蛋白家族Rv1168c进行高效表达,进一步进行蛋白纯化和结构分析。【方法】以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,扩增Rv1168c基因,构建pET32a-Rv1168c重组质粒;转化重组质粒到大肠杆菌DH5α并在BL21(DE3)诱导表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)鉴定Rv1168c在大肠杆菌中的表达情况;Ni-NTA His﹡Bind Resin纯化重组蛋白Rv1168c;SDS-PAGE和质谱分析测定相对分子量后,用圆二色光

    • 新疆羊粪便戊型肝炎病毒RNA的检测与序列分析

      2010, 50(7):937-941.

      摘要 (1117) HTML (0) PDF 979.63 K (1018) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】为了了解新疆地区羊群中是否存在戊型肝炎的感染,我们从戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus, HEV) IgG 检测阳性的新疆某羊场采集54份1-3岁的羊粪便,【方法】利用逆转录套式聚合酶链方法(RT-nPCR ),检测HEV RNA,其中6份为阳性,阳性率11.11%。【结果】将PCR扩增产物克隆,测序并进行序列分析,结果表明,6株羊源HEV检测株在HEV ORF2 189bp 99.38-100%,为同一基因型;与HEVⅠ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型的同源性分别为78.67-85.33%、8

    • 马立克氏病病毒meg基因敲除株感染性克隆的免疫效果评价

      2010, 50(7):942-949.

      摘要 (1018) HTML (0) PDF 3.17 M (863) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】比较和评价了敲除meq基因的MDV感染性克隆作为新型DNA疫苗的免疫保护效果。【方法】将1日龄SPF鸡饲养于正压过滤空气的SPF动物饲养隔离罩内。1日龄时,将SPF鸡以10 μg /只的剂量通过大腿肌肉注射的方式接种溶解于PBS缓冲液中的敲除meq基因的MDV感染性克隆GX0101Δmeq-BAC,分别在免疫后5天或12天以500 PFU/只的剂量接种超强毒rMd5。饲养90天,观察死亡情况,对每一只鸡剖检并取心脏与肝脏做石蜡切片,进行病理观察。【结果】免疫5天后攻毒,CVI988/Risp

    • 聚乙二醇作为乙型肝炎病毒DNA疫苗佐剂的体外试验

      2010, 50(7):950-955.

      摘要 (1594) HTML (0) PDF 1.46 M (1147) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】研究聚乙二醇作为佐剂是否能够增强HBV DNA疫苗体液和细胞免疫效果。【方法】我们将乙型肝炎病毒(HBV) DNA 疫苗(pVAX-S2)单独或PEG/pVAX-S2免疫C57BL/6小鼠,在最后一次免疫1 d检测抗-HBs IgG、T淋巴细胞增殖、细胞因子表达及体内细胞毒T淋巴细胞杀伤作用(CTL)等免疫学指标。【结果】结果表明,与仅免疫pVAX-S2比,PEG/ pVAX-S2能够增加免疫小鼠抗-HBs IgG水平; 混合免疫组的T淋巴细胞体外经乙肝表面抗原(HBsAg)刺激后,T淋巴细

    • >研究简报
    • 不同培养条件对胶质芽孢杆菌诱导碳酸钙晶体形成的影响

      2010, 50(7):956-962.

      摘要 (1736) HTML (0) PDF 2.40 M (1494) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】研究不同培养条件对胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)菌体形态、数量和分泌的碳酸酐酶(CA酶)活性的影响,以及不同方式培养的菌体与碳酸钙晶体的生长及其形貌、数量之间的联系。【方法】分别采用无氮和有氮培养基培养胶质芽孢杆菌,进行菌体形态、数量及CA酶活性的比较,收集不同培养方式的菌体加入碳酸钙结晶体系中以研究细菌与碳酸钙晶体形成的联系。【结果】在无氮培养条件下,胶质芽孢杆菌数量少、荚膜肥厚,细菌培养液CA酶活力较低;有氮培养条件下,菌体数量多、荚膜单薄,细菌培养液CA酶

    • 小麦条锈菌PsNCS1基因的克隆及转录表达特征

      2010, 50(7):963-969.

      摘要 (1059) HTML (0) PDF 1.96 M (1297) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】克隆小麦条锈菌神经钙离子感应蛋白基因PsNCS1,分析其在病菌不同发育时期的表达水平。【方法】利用文库筛选和RT-PCR技术克隆PsNCS1的cDNA序列,采用生物信息学技术预测分析该基因编码蛋白的保守结构域及基本特性,构建系统发育树;运用实时荧光定量RT-PCR技术分析PsNCS1在病菌不同生长发育时期的表达水平。【结果】PsNCS1全长cDNA为1007 bp(GenBank登录号GU134621),开放阅读框为573 bp,编码190个氨基酸,分子量为22.17 kDa, 等电点为4.

    • 解脂耶氏酵母脂肪酶基因lip1的克隆、密码子优化及功能表达

      2010, 50(7):970-975.

      摘要 (1442) HTML (0) PDF 28.97 M (5399) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:【目的】克隆解脂耶氏酵母(Yarrawia lipolytica)脂肪酶基因lip1,并通过密码子优化,首次实现其在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的诱导型和组成型表达。【方法】通过PCR扩增Y. lipolytica脂肪酶基因lip1,根据P. pastoris密码子偏爱性,运用重叠延伸PCR合成改造后基因MLip1,将其分别克隆至诱导型分泌载体pPIC9K和新构建的组成型分泌载体pGAP9K上,电转至P. pastoris GS115中,G418抗性筛选得到高拷贝转化重组子,摇瓶发酵

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