摘要:采用选择性扩增片断长度多态性(简称AFLP)DNA指纹技术对采自我国云南省与西藏交界的高山地区的野生型豆科植物毛苜蓿根际土样分离的291株毛苜蓿(Medicago edgeworthii)根瘤菌进行遗传多样性的研究。从AFLP图谱中，揭示出毛苜蓿根瘤菌有较显著的遗传多样性，从291株中选择出90个代表株用计算机进行树状图的分析。结果表明，所分析的菌株在79%的相似性水平上聚类成3个群。对这90个代表株进行多聚酶链反应(PCR)扩增的16S rDNA的4种限制性内切酶长度多态(简称16S rDNA PCR\|RFLP)分析，得出2个不同的16S rDNA PCR\|RFLP类型的菌株。分别选出这2个类型的代表菌株与各种根瘤菌的参比菌株进行16S rDNA PCR\|RFLP分析，再进行树状图的分析，初步得出了它们在根瘤菌系统分类中的地位。分析结果表明：毛苜蓿根瘤菌与根瘤菌属中的Rhizobium mongolense的相似性很高。

摘要:在对云南省烟草病毒病的研究中，分离到一种直径约26～30nm的球形病毒。提纯病毒进行的SDSPAGE发现一条55kD蛋白带。55kD蛋白N端10个氨基酸与CMV亚组II的Q株系外壳蛋白N端氨基酸同源性为100%。以CMVQ抗血清对55kD蛋白进行了Western blot检测，发现55kD蛋白与CMV Q株系抗血清有血清学反应。根据已报道的CMV亚组II外壳蛋白基因序列合成引物，采用RTPCR技术扩增到一条约09kb的cDNA条带，并进行了克隆及序列测定，经Genbank比较，发现此09kb cDNA包含一657bp的外壳蛋白基因，其核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与CMV亚组II分离物有极高的同源性，分别达97%～98%和96%～99%，而与亚组I分离物的同源性仅为75%～76%和78%～79%。因此，该球形病毒应为CMV亚组II的一个分离物，命名为CMVYnb。

摘要:在人工气候箱内，以小麦为寄主建立了专性寄生禾谷多粘菌(Polymyxa graminis)的侵染体系，使P.graminis能够快速大量繁殖，生活史缩短为13～15d。简化了单孢子堆分离以及病根表面消毒等分离纯化方法，对接种菌源材料、寄主苗龄、温度、pH值及营养液成分等影响因素进行了测定，优化完善了P.graminis的砂培条件。建立了针对小麦黄花叶病毒(wheat yellow mosaic virus, WYMV)的稳定高效室内传毒体系。在此体系上，真菌传带病毒的效率可达70%，机械接种病毒后的小麦显症时间可缩短至30d左右。

摘要:极端嗜热古菌——芝田硫化叶菌DNA结合蛋白Ssh7a和Ssh7b的编码基因(ssh7a和ssh7b)在大肠杆菌中得到表达，表达量均达到细胞蛋白总量的10%～15%。重组蛋白通过一个包括热处理步骤的简单纯化程序得到纯化。重组Ssh7a和Ssh7b与松弛及负超螺旋DNA的结合与天然Ssh7蛋白无异，与天然Ssh7相似，Ssh7a在与DNA结合时能够固定负超螺旋，每固定一个负超螺旋约需22个Ssh7a分子。这些结果表明天然Ssh7蛋白中的两个同源多肽与DNA结合时无明显差异。另外，Ssh7的甲基化与否似乎不影响该蛋白对DNA的亲和力及固定DNA超螺旋的能力。

摘要:通过Southern杂交发现高毒力苏云金芽胞杆菌(\%Bacillus thuringiensis)\% YBT1520菌株含有两个杀虫晶体蛋白基因片段，其5’末端所在HindⅢ片段分别为68kb和46kb，它们对应的基因分别命名为cry218和cry46。经PCR鉴定，该菌含有cry1Aa\,cry1Ab和cry1Ac基因，以及cry2基因，其中cry218属于cry1Ac。分析了cry218基因4190bp的核苷酸序列，在杀虫晶体蛋白基因分类系统中被命名为cry1Ac10。结合Southern杂交和PCR结果可判断3个cry1A基因的拷贝数不同，其中cry1Ac拷贝数最高，YBT1520菌株与其它库斯塔克亚种的杀虫晶体蛋白基因所在限制性内切酶位置明显不同。

摘要:利用已建立的苏云金芽孢杆菌cry基因的PCRRFLP鉴定体系，鉴定了31株Bt菌株的cry基因类型，并进行了SDSPAGE分析和杀虫生物活性测定。研究表明：25株含cry1基因，表达蛋白130～150kD;其中16株含有对鞘翅目和鳞翅目害虫皆有活性的cry1I基因，其表达蛋白为81kD;15株同时含有cry1和cry2基因(13株表达蛋白约为60kD)；10株含有未知待定基因；6株不含所鉴定的cry基因(其中2株有表达产物)。室内生物测定表明：cry1、cry2基因表达的菌株对鳞翅目害虫具有高杀虫活性，7株对舞毒蛾和膜翅目——杨叶蜂幼虫具有较高杀虫活性；含有cry1Aa\,cry1Ac\,cry2或cry1Ab\,cry1Ac\,cry2基因组合的菌株对棉铃虫幼虫均显示杀虫活性，其中6、12、30号菌株毒力最强。不含上述cry基因的菌株均无杀虫活性。以上结果证明，通过cry基因类型鉴定和表达产物的SDSPAGE分析可以预测菌株的杀虫活性。

摘要:用PCR技术从棉铃虫颗粒体病毒基因组中扩增得到增效蛋白基因DNA序列。PCR产物酶切后克隆至pBluescript质粒中，核苷酸序列测定表明，有8个核苷酸、5个氨基酸与Genbank发表的序列不同。继而构建了表达质粒pET\|30a\|En,诱导后经SDS\|PAGE和Western blot检测，表明获得了增效蛋白基因在大肠杆菌BL21(DE3)中包涵体形式的特异表达。生物测定结果表明，初步纯化的重组增效蛋白具有明显的增效活性，可提高棉铃虫核多角体病毒对3龄幼虫致死率317%-341%。重组增效蛋白的获得对研究其增效机理及构建新型杀虫剂提供了条件。

摘要:用\%Bam\%HⅠ和\%Sac\%Ⅰ双酶切质粒pCM1\|1，获得酵母的MTI基因片段，用非放射性地高辛标记作为探针。提取桑蚕肥苏蚕卵的总DNA，分别用\%Eco\%RⅠ、\%Bam\%HⅠ和\%Hin\%dⅢ酶切，与MTI探针进行Southern杂交，出现较强的杂交信号。然后用\%Eco\%RⅠ完全酶切桑吞的总DNA，电洗脱法回收1～6kb的染色体片断，与\%Eco\%RⅠ酶切的M13-载体以3∶1比例连接，转化受体菌DH5α。筛选到4 000多个白色转化子，与探针MTI进行Southern杂交筛选阳性转化子，选择到有强杂交信号的三个转化子［编号为T1(pZHC\|1)\,T5(pZHC\|5)\,T7(pZHC\|7)\]。用12种限制性内切酶对pZHC\|5重组质粒进行酶切分析表明插入片段约12kb，在基因内有一个\%Hin\%dⅢ位点。抗性测定表明受体菌DH5α在含有50mmol/L CuSO\-4的培养基上生长，在含有52mmol/L CuSO\-4的培养基上不生长，而转化子确能在含有52mmol/L CuSO\-4以上的培养基上生长。上述研究结果表明12kb左右的插入片段含有桑吞的金属硫蛋白基因。

摘要:用恶性疟原虫MSP131基因片段的重组质粒DNA直接免疫BALB/c小鼠，诱导产生体液，免疫后取脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞在PEG1450作用下进行融合，获得了2株能分泌抗恶性疟原虫MSP131单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株9H9和8A2。用酶联免疫吸附试验检测，小鼠腹水抗体滴度最高为1∶10 000。经免疫球蛋白类型和亚类鉴定，2株杂交瘤细胞株均为IgG\-1\.蛋白免疫印迹试验表明，此单克隆抗体与MSP1\|31蛋白抗原有特异免疫反应，证明通过质粒DNA直接免疫小鼠可制备特异性单克隆抗体。

摘要:从浙江长兴县农村传统家酿红酒的小曲中分离出一 红曲菌菌株(Monascus sp.),对它产生的DPPH自由基捕捉物质进行了筛选。结果表明：自由基捕捉活性和得率以醋酸乙酯的中性提取物较高；培养时间以30℃,100r/min摇床5d为好；对醋酸乙酯的中性提取物进一步进行了硅胶柱层析、LH20柱层析、MPLC、HPLC分部收 集，并用HPLC检验其纯度，获得收量在2mg以上，纯度在85%以上的自由基捕捉物质15个，对其中有代表性的B13、C317进行了1HNMR和13CNMR分析，确定它们的大致结构为苯的三取代衍生物，C317很可能是3羟基，4甲氧基苯甲酸；并对B13、C317的自由基捕捉活性进行了测定，40μmol/L的B13其自由基捕捉活性约为65%，40μmol/L的C317其自由基捕捉活性小于56%，均略低于Vc和Ve。

摘要:对黑曲霉(Aspergillus niger)3.795进行紫外诱变和筛选，获得了胞外蛋白酶缺失的菌株。其中突变株37951、3795123和3795130的生长特性与原株基本相同，胞外蛋白酶的活性明显低于原株，葡萄糖淀粉酶的活性与原株基本相同。突变株3795123和3795130的胞外蛋白酶活性分别为原株的54%和84%，可作为外源基因高效分泌表达的宿主菌。

摘要:为提高假诺卡氏放线菌的分离效率，根据其营养特性和对抗生素的敏感性，设计、检验了5种选择性分离培养基；实验检测了模式菌株在不同培养基上的生长情况，结果表明培养基S1和S2对假诺卡氏菌的生长有显著的选择性。经该方法从韩国、印度尼西亚和中国广西地区不同土样中分离到一些假诺卡氏放线菌。

摘要:用聚氨酯泡沫吸附固定米根霉菌丝，在三相流化床中对葡萄糖、木糖以及木糖渣的纤维素酶解液等不同碳源进行L乳酸发酵研究，并对游离菌丝和固定化菌丝发酵L乳酸进行了比较。结果表明，聚氨酯泡沫是米根霉的良好载体，具有经济、高效等特点。实验条件下，不同碳源的乳酸转化率分别为：葡萄糖，82.5%；木糖，53.8%；木糖渣酶水解液，71.9%。三相流化床中固定化米根霉产酸速率(对葡萄糖)为191g.h-１.L(bead)-1。

摘要:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM9602产生的中性内切β甘露聚糖酶(endoβ1,4Dmannan mannanohydrolase,EC,3.2.1.78)经硫酸铵分级沉淀、DEAE纤维素(DE22)离子交换柱层析，得到电泳纯的样品，提纯了455倍，收率为59%。用SDSPAGE测得该酶的分子量为35kD。用PAGEIEF测得其等电点pI为45。酶反应的最适pH为5.8，最适温度为50℃。该酶在pH60～80，50℃以下稳定。金属离子Hg2+和Ag+对酶活性强烈抑制。酶对槐豆胶、羟丙基瓜胶、田菁胶和魔芋粉的Km值分别为38、149、113和24mg/mL，Vmax值分别为245、865、384和198μmol.min-1mg-1。酶水解甘露聚糖为甘露寡糖(不含单糖)。

摘要:巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)D01菌体吸附Au3+的最适pH值为30，其生物吸附作用是一种快速的过程，最初5min的吸附量可达到最大吸附量的95%，温度不影响该吸附作用。在pH3.0和30℃、起始金离子浓度与菌体浓度之比为305mg/g的条件下，吸附30min，吸附率达99.1%，吸附量为302.0mg/g干菌体。D01菌体能将溶液中的Au3+还原成Au0，在细胞表面和溶液中的Au0能形成不同形状的金晶体。浸渍在SiO2和αFe2O.3的Au3+能被D01菌体还原成Au0。从电化学反应表明，D01菌体对Au3+的还原具有较好的选择性。

摘要:华丽曲霉(Aspergillus ornatus)Z58有机磷农药降解酶经硫酸铵分级沉淀、Sephadex G100凝胶过滤、DEAE52离子交换层析得到了分离纯化，用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定为单一组分。凝胶过滤法测得分子量为67 000，提纯倍数为34.2，收率为17.8%。该酶的最适反应温度45℃，最适反应pH72，对热较稳定，并且能在pH6～10范围保持活性。重金属Cu2+对该酶具有明显的促进作用，而SDS对酶具有抑制作用。此酶对所试的有机磷农药都有较好降解作用。

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